胍基丁胺对大鼠血流动力学的影响及其细胞机制.docVIP

　224　生理学报, 1999年4月, 51(2 , 224～228 Acta Physiologica Sinica 中脑导水管周围灰质内注射抗阿片肽血清 对神经降压素增强电针镇痛的影响 白　波　王　宏　刘文彦　宋朝佑3 (济宁医学院神经生理研究室, 济宁272113; 3第二军医大学神经生物学教研室, 上海200433 摘　要　　本工作以钾离子透入引起大鼠甩尾反应作为痛反应指标, 观察纳洛酮(NX 和抗阿片肽血清对大鼠中脑导水管周围灰质(PAG 内微量注射神经降压素(NT 增强电针镇痛作用的影响。结果显示:(1 PAG 内微量注射NT 后, 大鼠电针镇痛效应明显提高; (2 PAG 内注射大剂量NX , 可以显著减弱NT 增强电针镇痛效应; (3 PAG 内微量注射抗甲2脑啡肽血清和抗β2内啡肽血清后, NT 增强电针镇痛的作用明显降低; 而PAG 内微量注射抗强啡肽A 1213血清, 对于NT 增强电针镇痛的作用并无明显影响。提示:PAG 内NT 在针刺镇痛过程中发挥重要作用, NT 增强电针镇痛的作用与甲2脑啡肽和β2内啡肽有较密切的关系。 关键词:神经降压素; 中脑导水管周围灰质; 电针镇痛; 抗甲2脑啡肽血清; 抗β2内啡肽血清; 抗强啡肽A 1213血清 学科分类号:Q426; R33812 　　近年来, 国内外有关神经降压素(neurotensin , NT 在中枢神经系统中参与镇痛和针刺镇痛过程的研究积累了大量资料[1～3]。本实验室以往的工作也证实:大鼠中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray , PAG 内的NT 在镇痛和电针(E A 镇痛过程中起重要作用[2,4]。有资料显示, PAG 内含有丰富的NT 神经纤维、NT 受体, 和内源性阿片肽神经末梢及其受体的分布相伴行。但对镇痛和电针镇痛时PAG 内NT 与内源性阿片肽系统之间关系的研究尚未见报道。本工作向大鼠PAG 内微量注射纳洛酮(NX 、抗甲2脑啡肽血清(AMEK S 、抗βNS 等, 观察它们对PAG 内NT 增强电2内啡肽血清(AEPS 和抗强啡肽A 1213血清(ADY 针镇痛作用的影响, 探讨PAG 内的NT 和内源性阿片肽在痛觉调制过程中的关系。 实验用健康雄性Wistar 大鼠(体重190～230g 。采用戊巴比妥钠(35mg/kg 腹腔内注射麻醉。根据L 1J 1Pellegrino 鼠脑定位图谱, 借助江湾Ⅱ型脑立体定向仪, 按照坐标A 2614、LR015、H510, 埋置外径016mm 的不锈钢导管, 之后用“502”胶和牙科水泥固定。术后3～5d 进行实验。注射时将不锈钢注射管插入导管内, 尖端伸出管外1mm , 注入药液110μl , 3min 注射完毕。 按照常规方法固定大鼠30min 后, 开始实验。用W Q 29E 型钾离子透入痛阈测量仪测痛, 以引起大鼠甩尾的最小电流强度(mA 为痛反应值, 间隔1min 的3次痛反应的平均值作为痛阈(pain threshold , PT , 每10min 测定痛阈一次, 取电针或给药前两次痛阈的平均值作为基础痛阈。将电针后各次痛阈和基础痛阈相比, 计算痛阈变化率(% 。以30min 电　　1998203202收稿　　1998204227修回 针期间3次痛阈变化值的均数和停针后30min 内3次痛阈变化值的均数, 作为衡量电针镇 。痛的平均针刺效应(简称“平均针效”利用W Q 26F 电针仪电针大鼠双侧“足三里”, 给予疏 密波(f1, 2H z ; f2, 12H z , 强度以引起两后肢轻微颤动为准(1～3V 。 实验结束后, PAG 内注射等体积的氨基黑B10, 按照常规方法灌流、取脑、固定、切片。镜下观察, 凡定位点偏离PAG 的标本, 其实验结果均弃之不用。 NT 为美国Peninsula Lab 产品, NX 为美国Sigma 公司出品。AMEK S 、AEPS 、ADY NS 以及正常兔血清(NRS 均为第二军医大学神经生物学教研室制备。AMEK S 、AEPS 、和ADY NS 的滴度分别为1∶5000、1∶30000和1∶30000, 相互间无交叉反应。 各组数据以均值±标准误(±s 表示, 两组间显著性差异用t 检验进行统计学处理。实验结果如下: 11　NT 对电针镇痛的影响 (NT 2E A 组 , 在30min 右侧PAG 内注入100ng NT 10min 后, 电针大鼠双侧“足三里” 电针期间平均针效为(196196±11143 %, 停针后30min 内为(102171±9106 %, 与NS 2E A 组相比, 均有非常明显的增高(P 0101 。注入25ng 和50ng NT 后电针期间, 大鼠平均针效分别为(57125±814