【高优指导】2017版高三生物一轮复习第13单元生物技术实践1无菌操作技术实践苏教版.ppt

* * * * * * * * * * -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 考点二植物组织培养 1.概念:植物组织培养是指在　无菌　和　　人工控制　　的条件下,将　　离体　　的植物器官、组织或细胞,在适宜的培养条件下诱导其产生　愈伤组织　、　　丛芽　　和完整植株的技术。? 2.植物组织培养的依据:植物细胞的　　全能性　　。植物细胞的全能性是指植物体的每个细胞都携带着一套来自受精卵的完整　　基因组　　,并具有发育成　　完整植株　　的潜在能力。? 3.植物细胞全能性表达的条件:　　无菌　　、适宜的营养及其他外界条件。? -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 4.取材:生产中广泛应用植物的　茎尖　或叶片进行组织培养,达到农作物品种的复壮、病毒感染的　　脱除　　和快速繁殖等目的。? 5.天竺葵的组织培养 (1)准备:准备植物组织培养所需的实验器材及药品等。 (2)配制:配制MS基本培养基。分别向MS基本培养基中添加所需的　　激素　　,配制诱导愈伤组织形成的培养基、分化芽的培养基、生根的培养基。将上述培养基调节pH后分装到若干个50 mL锥形瓶中,塞上棉花塞,用牛皮纸包扎。? (3)灭菌:将培养基　　121　　 ℃湿热灭菌20 min,冷却后置于30 ℃培养室中观察3 d,以检查是否灭菌彻底。灭菌彻底的培养基用于天竺葵的组织培养。? -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 (4)取材与接种:在无菌室中或超净工作台上进行。取材后用10%的　　漂白粉　　或质量分数为2%的次氯酸钠溶液处理5~15 min,取出用　　无菌水　　冲洗,然后切成约0.5 cm2的小块,接种于配制好的诱导愈伤组织形成的培养基上。塞紧瓶口并用牛皮纸包扎。瓶上贴标签,注明材料名称、接种日期和接种人姓名或小组序号。在15~20 ℃、光照强度为1 000~2 000 lx条件下,每天光照10 h进行培养。? (5)观察与记录:观察　　外植体　　的生长情况,记录愈伤组织(一种具有　　分生　　能力的　　薄壁　　细胞)的大小、质地、颜色或根、芽分化等变化情况。? (6)转移培养:愈伤组织→分化芽的培养基(15~20 ℃、光照强度为1 000~2 000 lx)→生根的培养基→试管苗→炼苗→移栽于大田。 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 判一判植物组织培养的条件之一是材料必须是离体后的植物组织或器官。(√) 　提示:离体的组织或器官发育成完整个体的过程才能体现全能性。 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 1.制备MS固体培养基 (1)配制各种母液:大量元素配制成10倍浓缩液,微量元素配制成100倍浓缩液,微量有机物配制成1 mg/mL的母液。 (2)配制培养基:按配方称取琼脂、蔗糖以及各种母液,配制MS培养基。在菊花组织培养中,可以不添加植物激素,原因是菊花茎段组织培养比较容易。 (3)灭菌:采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 2.外植体消毒流程图 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 3.接种、培养、移栽和栽培 (1)前期准备:用70%的酒精消毒工作台,点燃酒精灯。所有工作都必须在酒精灯旁进行,器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。 (2)接种操作:插入外植体时形态学上端朝上,每个锥形瓶接种7~8个外植体。 (3)培养过程:应该放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持适宜的温度和光照。 (4)移栽:打开封口膜,在培养间生长几日;然后用流水清洗根部培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间,进行壮苗。最后进行露天栽培。 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 4.影响植物组织培养的主要因素 (1)培养材料: ①不同的植物组织,培养的难易程度差别很大,容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。 ②同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。 (2)无菌条件:培养基上有细菌等微生物存在时,它们比植物细胞生长、繁殖得更快,而且它们会产生毒素,使培养的植物细胞很快中毒死亡,因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 (3)植物激素:在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等,都会影响实验结果。 ①按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验结果(如下表)。 -*- 考点一 考点二 自主梳理 典题试做 核心突破 ②当同时使用这两类激素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向