CN103314782A一种制备红汁乳菇菌根的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN103314782A* *CN103314782A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 103314782 A (10)申请公布号 CN 103314782 A (43)申请公布日 2013.09.25 (21)申请号 201310238366.8 (22)申请日 2013.06.17 (71)申请人 吉林农业大学 地址 130000 吉林省长春市新城大街2888 号 (72)发明人 冀瑞卿 李玉 朱姝蕊 (74)专利代理机构 深圳市君胜知识产权代理事 务所 44268 代理人 杨宏 (51)Int.Cl. A01G 1/04 (2006.01) C05G 1/00 (2006.01) 权利要求书2页 说明书6页 附图1页 权利要求书2 页 说明书6 页 附图1 页 (54)发明名称 一种制备红汁乳菇菌根的方法 (57)摘要 本发明公开了一种制备红汁乳菇菌根的方 法，其包括以下步骤：采用组织分离法，在无菌条 件下取红汁乳菇的菌柄与菌盖之间的组织接种于 PDA 试管斜面培养基上，待所述PDA 试管斜面培养 基组织块儿上长出菌丝后，将其转接到WYA 试管 斜面培养基上进行避光培养，并通过培养后得到 纯净红汁乳菇菌丝、红汁乳菇液体菌剂与固体菌 剂，将上述纯净红汁乳菇菌丝、红汁乳菇液体菌剂 与固体菌剂分别接种到一年苗龄的板栗无菌苗之 根系上培育至少三个月，从板栗无菌苗之根系上 得到红汁乳菇菌根。在适宜的条件下通过培育板 栗菌根苗获得红汁乳菇子实体，为人工栽培红汁 乳菇菌根奠定了坚实的基础，方便了人工栽培。 A A 2 2 8 8 7 7 4 4 1 1 3 3 3 3 0 0 1 1 N N C C CN 103314782 A 权 利 要 求 书 1/2 页 1. 一种制备红汁乳菇菌根的方法，其包括以下步骤： A、采用组织分离法，在无菌条件下取红汁乳菇的菌柄与菌盖之间的组织接种于PDA 试 管斜面培养基上，待所述PDA 试管斜面培养基组织块儿上长出菌丝后，将所述菌丝的一部 分转接到WAY 试管上进行避光培养得到的纯净红汁乳菇菌丝，另一部分转通过液体培养得 到红汁乳菇液体菌剂，最后一部分通过红汁乳菇的二级种培养，制得固体菌剂； B、将上述纯净红汁乳菇菌丝、红汁乳菇液体菌剂与固体菌剂分别接种到一年苗龄的板 栗无菌苗之根系上培育至少三个月，从板栗无菌苗之根系上得到红汁乳菇菌根。 2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤A 具体的包括：待WYA 平板培养 基长满红汁乳菇菌丝后，可以直接作为再生菌种菌剂备用；待WAY 平板培养基长满红汁乳 菇菌丝后，用直径0.5cm 的打孔器在WYA 试管斜面培养基上打孔，得到菌片，将菌片投入WY 培养液中培养，在每250mLWY 培养液中加入5-6 个菌片，接种后静止24 小时-48 小时后，在 温度为28℃，转速为160r/min 的电子恒温震荡箱中，持续培养10天-15 天后制得液体菌剂 备用；待WYA 试管斜面培养基长满红汁菇菌丝后，将其接种到二级种培养袋中培养支撑固 体菌剂备用。 3. 根据权利要求2 所述的方法，其特征在于，所述步骤A 具体的还包括：待