CN102793913A重组小鼠EPS8肿瘤疫苗及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102793913A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102793913 A (43)申请公布日 2012.11.28 (21)申请号 201210274620.5 C07K 14/47 (2006.01) (22)申请日 2012.08.02 (71)申请人 南方医科大学珠江医院 地址 510000 广东省广州市海珠区工业大道 中253 号 (72)发明人 李玉华 李超 胡亮杉 贺艳杰 王磊 (74)专利代理机构 广州市越秀区海心联合专 利代理事务所 (普通合伙) 44295 代理人 马丽丽 (51)Int.Cl. A61K 39/00 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) 权利要求书 2 页 说明书 12 页 C12N 15/70 (2006.01) 权利要求书2 页 说明书12 页 序列表 1 页 附图 3 页 序列表1 页 附图3 页 (54)发明名称 重组小鼠EPS8 肿瘤疫苗及其制备方法和应 用 (57)摘要 本发明公开了一种重组小鼠EPS8 肿瘤疫苗， 本发明还公开了该疫苗的制备方法，包括如下步 骤：重组小鼠rmHis-Eps8 基因的克隆及原核表达 载体的构建：采用RT-PCR 方法获得Eps8 第一个 胞外区第440 位氨基酸至第710 位氨基酸的基因 片段，插入pET28a 原核表达载体，转入大肠杆菌 BL21，在大肠杆菌中获得高效表达，经纯化和超滤 柱浓缩蛋白后得到。所得疫苗能够延长4T1 荷瘤 小鼠的生存时间，抑制小鼠体内4T1 乳腺癌细胞 的增殖，为临床上对于难治复发性恶性肿瘤的治 疗提供新的策略。 A 3 1 9 3 9 7 2 0 1 N C CN 102793913 A 权 利 要 求 书 1/2 页 1. 一种重组小鼠EPS8 肿瘤疫苗，其特征在于含有如下氨基酸序列的蛋白质： Pro Pro Met Leu Asn Phe Met Gly Ala Pro Thr Glu Gln Asp Met Tyr 1 5 10 15 Gln Leu Ala Glu Ser Val Ala Asn Ala Glu His Gln Arg Lys Gln Asp 20 25 30 Ser Lys Arg Leu Ser Thr Glu His Ser Asn Val Ser Asp Tyr Pro Pro 35 40 45 Ala Asp Gly Tyr Ala Tyr Ser Ser Ser Met Tyr His Arg Gly Pro His 50 55 60