《第十二章荧光分析法(药学)8》-公开课件.ppt

四、荧光分析法应用 （一）有机化合物的荧光分析 维生素、氨基酸和蛋白质、胺类和甾族化合物、酶和辅酶以及各种药物、毒物和农药等，许多均能发射荧光，可以用荧光分析法进行测定或研究其结构或生理作用机制。 （二）无机化合物的荧光分析 利用待测元素与有机试剂组成的能发荧光的配合物进行荧光法分析的无机元素已近70种。 小 结 一、基本概念 荧光、振动驰豫、内部能量转换、外部能量转换、体系间跨越、磷光、激发光谱、发射光谱、瑞利散射光、拉曼散射光。 二、基本理论 荧光效率 荧光光谱的特征 有机化合物分子结构与荧光的关系 影响荧光强度的外部因素（温度、溶剂、酸度、散射光） 荧光定量分析法（校正曲线法、比例法、联立方程式法） 荧光分析仪器 光学分析法小结：UV-Vis,AAS,MFA对比 方法 UV-Vis AAS MFA 光谱 特征 带状吸收光谱 锐线光谱 带状发射光谱 A-? K0-? F-?ex 激发光谱 F-?F 荧光光谱 定性依据 ----- 定性依据 定量分析 A=? b c A=KC F=k? I0.2.3 abc (abc≤0.05) 单色光 锐线光源 强光源 峰值吸收 稀溶液（A＜0.05) 定量方法 标准曲线法 标准曲线法 标准曲线法 比较法，示差法 比较法 比较法 解联立方程法等 标准加入法 解联立方程法 仪器 紫外可见分光光度计 原子吸收分光光度计 荧光光度计 （结构框图） 单波长，双波长 单光束，双光束 荧光分光光度计 单光束，双光束 （垂直方向检测） 干扰 非单色光，光度误差 光谱干扰， 溶剂，温度.酸度 物理化学因素 物理、化学干扰， 散色光 影响显色反应的因素 电离干扰，背景吸收 荧光熄灭剂。激发光 谢谢！ ? 苯 萘 蒽 维生素A 205nm 286nm 356nm 327nm 278nm 321nm 404nm 510nm ? 0.11 0.29 0.36 ? 分子的刚性和共平面性越大，?越大，荧光强度越强。