谷草转氨酶AST测定标准操作程序SOP文件.docVIP

ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-06 AST测定 版序：ABCD 页码：第1 页，共4 页 1 测定方法 酶动力学法。 2 测定原理 L-精氨酸 + а-酮戊二酸 谷草转氨酶 草酰乙酸 + L-谷氨酸 草酰乙酸 + NADH + H+ 苹果酸脱氢酶 苹果酸 + NAD+ 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与标本中酶活性成正比，因此可通过监测吸光度的下降速率，计算出AST的活性单位。 3 标本 血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见标本处理程序。 稳定性：20-25℃ 稳定1天 4－8℃ -20℃ 4 试剂 4.1试剂 来源：ROCHE配套 试剂（详见试剂说明书）。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃ R1：打开后机上稳定28天 R2：打开后机上稳定90天 准备：R1：将试剂R1与1a互溶后使用。 R2：直接使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE配套校准物,符合WHO标准，具体如下： S1:0.9%NaCl S2:C.f.a.s 贮存条件：校准物在2-8℃ 准备：直接使用。 定标频率：A 试剂盒在仪器上放置28天后 B试剂批号更换后 C 由质控结果决定 4.3 质控物 来源：Precinorm (罗氏正常值质控) Precipath (罗氏病理值质控) 其它适合的质控品 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-06 AST测定 版序：ABCD 页码：第2 页，共4 页 贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。 6 上机操作 见仪器作业指导书。 7 参考范围 男性：0-37U/L；女性：0-31U/L。 8 性能指标 本法线性范围为4-800U/L，不准确度允许范围±20%，不精密度CV=3.2%，本法灵敏度4U/L。 9 注意事项 9.1 血清中含有酮酸能消耗NADH，使结果偏高；血清中谷氨酸脱氢酶增高时，在有氨存在的条件下，亦消耗NADH，使结果偏高。 9.2 血清不宜反复冷冻保存，以免影响酶的活性。 9.3红细胞内AST约为血清的10倍，故溶血标本可使测定结果偏高。剧烈的体力劳动，因骨骼肌细胞通透性增加，酶活力也增高。 9.4血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。 9.5换算公式：U/l × 0.0167=ukat/l 9.6仅应用于体外诊断。 9.7扔弃废物应符合当地的法规。 10抗干扰能力： 10.1 标准：回收率在90％－110％之间。 10.2 黄疸：黄胆指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl） 10.3 脂血：乳糜指数达到500明显干扰。（甘油三酯浓度约为1000mg/dl）。 11 临床意义 精氨酸氨基转移酶属于转移酶类，它能够催化氨基与酮酸之间氨基的转移。在人体的很多组织中均能发现精氨酸氨基转移酶。其中，其在心肌中的活性最大，其次是脑、肝、骨骼肌以及肾等组织中。 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-06 AST测定 版序：ABCD 页码：第3 页，共 4页 转氨酶的水平升高可能于是有心肌、肝脏等器官损伤，主要见于下列疾病： 急性肝炎、药物中毒性肝坏死，AST显著升高有时可达1000单位以上。 肝癌、肝硬化、慢性肝炎、心肌炎等中度增高。 胸膜炎、肾炎及肺炎等轻度升高。 心肌梗死时AST活性明显增高，常在急性心梗发生后6～12小时开始升高，24～48小时达高峰。约3～6天内可降至正常。 骨骼肌疾病如进行性肌营养不良、皮肌炎、挤压性肌肉损伤等AST也可升高。 AST与ALT的比值对肝病诊断也有一定意义，病毒性肝炎病程中ALT持续升高，急性病毒性肝炎时AST/ALT比值＜1，原发性肝癌时＞3。因此同时测定AST和ALT的活性，并在病程中观察其变化，对肝病鉴别和了解病情变化有一定意义。 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-06 AST测定 版序：ABCD 页码：第4 页，共4 页 AST参数设置表 TEST NAME [ AST ] R.VOLUME(R4) [ 0 ] TEST CORD [ 687 ] ABSORBANCE LIMIT [ 5500/DECREASE ] ASSAY