蛋白电泳在肾脏疾病中的实际临床应用.pptVIP

血清免疫固定电泳 ELP 泳道: 固定液 G 泳道： 抗 IgG 重链抗血清 A 泳道： 抗 IgA 重链抗血清 M 泳道： 抗 IgM 重链抗血清 K 泳道： 抗? 轻链抗血清 L 泳道： 抗 ?轻链抗血清 仪器： Sebia 琼脂糖凝胶电泳仪 试剂：免疫固定电泳试剂 灵敏度：31-125ug/L 正常血清免疫固定 确认IgM ?型M蛋白 血清蛋白免疫固定电泳应用举例 （1） IF 在?区 发现疑似M蛋白 轻链病 血清蛋白免疫固定电泳特殊病例 免疫固定结果显示为单独的 l 成分 本周氏蛋白 1844年Henry Bence Jones 在一个骨髓瘤患者尿中发现 一种具有特殊凝溶性质的蛋白 40－60℃发生沉淀，加热煮沸时溶解，冷却后又沉淀 轻链二聚体 大多数骨髓瘤患者尿中有本周氏蛋白 本周氏蛋白电泳的临床意义 浆细胞病的诊断和治疗监测 某些情况下，特别是对轻链型的M蛋白，比血清免疫固定电泳更加敏感 因为游离轻链的分子量比较小（25－50KDa）更容易通过肾脏清除进入尿液中，从而在尿中被检测到 90~100℃ 40~60℃ 室温 本周氏蛋白检测方法—热沉淀反应法 本周氏蛋白检测方法 ---尿液的免疫固定电泳 重链 参考泳道 复合轻链 游离轻链 4.尿蛋白电泳 * 白蛋白 转铁蛋白 免疫球蛋白 小分子蛋白 小分子蛋白 微量免疫球蛋白， 转铁蛋白，白蛋白 肾小球滤过 白蛋白 转铁蛋白 免疫球蛋白 小分子蛋白 小分子蛋白 肾小管重吸收 微量免疫球蛋白，转铁蛋白，白蛋白 尿液 SDS尿蛋白电泳图谱 SDS SDS + - 分子量标记 (kDa) 14.4 30 43 67 94 低分子量 ( 67 kDa) 高分子量( 67 kDa) 白蛋白 ( 67 kDa) 分子筛 肾小球性蛋白尿 67 kDa 白蛋白 67 kDa 67 kDa 67 kDa 67 kDa 67 kDa 肾小管性蛋白尿 混合性蛋白尿 67 kDa 67 kDa 67kDa 67kDa SDS尿蛋白电泳 15号样本BJ电泳 尿蛋白电泳的联合应用 尿本周氏蛋白电泳 游离kappa 尿蛋白检测到游离轻链 SDS非浓缩尿蛋白电泳检测的优势 敏感性高：检测限为15mg/L 标本收集：随机尿，无需浓缩(推荐晨尿) 检测结果 尿蛋白的全貌 直观反映肾脏受损部位 对不愿意进行肾穿检查的病人,可作为替代实验 动态观察：对确诊或不典型患者可进行动态观察 第四部分-给临床的报告单格式 报告单必须含有以下内容: 电泳条带图谱 检测结果的M蛋白峰必须给出%和g/L数值 全部图谱条带的解析 * 尿蛋白电泳报告单 * * 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C * * 石家庄市,-河北医科大学第三医院血液科 * * * * 电泳是个古老又新颖的技术 * * * 浆细胞病的诊断和治疗监测 某些情况下，特别是对轻链型的M蛋白，比血清免疫固定电泳更加敏感。因为游离轻链的分子量比较小（25－50KDa）更容易通过肾脏清除进入尿液中，从而在尿中被检测到。 * SDS是阴离子十二烷基硫酸钠的简写。SDS尿蛋白电泳，就是将尿液在电泳前，用过量SDS进行处理，将尿液中的蛋白质转变成SDS-蛋白络合物，蛋白质的自身形态被破坏，它们都具有相同的构造，且每个质量单位都有相同的负电荷。当此类SDS-蛋白络合物被加电泳胶片的点样处后，在电场力的作用下, SDS-蛋白络合物从负极向正极泳动。 分子量小的SDS-蛋白络合物能够较快地穿过琼脂糖凝胶的蜂窝状孔隙而继续向前泳动,但分子量大的SDS-蛋白络合物较慢穿过琼脂糖凝胶的蜂窝状孔隙，只能缓慢地向前泳动。 电泳一段时间后, 分子量最小的SDS-蛋白络合物走在最前面,其次是分子量大一点的, 如此类推, 从而达到了蛋白质,按分子量大小依次分离的目的。 * * * 河北省第三人民医院 1557例多发性骨髓瘤误诊分析 吕鸿雁, 张金巧. 河北医药. 2009, 31(9): 1052-54 误诊率：65.17% 重视实验诊断 39.8% 15.6% 19.8% 7.6% 15.6% 就诊晚 2/3 确诊时已达中晚期 误诊率高 1/3 非血液科首诊 60% 多发性骨髓瘤诊治现状 晚 骨折 预后差 增加负担 感染发生率高 肾脏病变不可逆 死亡率 ↑↑ 华西医院对-多发性骨髓瘤的误诊原因分析 MM缺乏特异性,首发症状多种多样。骨痛常为早期症状,骨质疏松或骨质破坏后,极易造成病理性骨折,误诊为骨科疾病 ☆发现尿蛋白或尿素氮