基础医学肿瘤遗传学二.pptxVIP

2、肿瘤抑制基因（Tumor Suppression Gene-TSG） 存在于正常细胞中能够抑制细胞恶性转化，对细胞的增殖起负性调节作用的基因，其失活使正常细胞增殖失控，进而转化形成肿瘤细胞。 其作用恰好与癌基因相反，其失活的TSG（突变、丧失功能）常发现于人类肿瘤样本中。这些基因编码抑制细胞增殖的蛋白, 抑制肿瘤细胞增殖。 TSG：在正常情况下对细胞的繁殖具有负调节作用，抑制癌基因。 Sager于1990年指出，在癌的发生过程中，需要基因改变，即癌基因的激活和抑癌基因的失活或丢失，二者在细胞繁殖的调控中起着正负信号的调节作用。现有抑癌基因30多种。抑癌基因的发现和深入研究乃是癌分子遗传学的一重大突破，很大程度上回答了癌发生这个长期难以解答的问题。 1）TSG的发现及其研究途径（TSG存在的证据）肿瘤的发生不仅仅涉及显性癌基因激活，而且还涉及其它隐性基因的功能丧失，这其它基因就是抑癌基因。①细胞融合实验 Harris（1971年）和Klein等实验 鼠正常细胞×肿瘤细胞 丧失成瘤性 鼠 杂种细胞（表型正常） 继续培养 形成肿瘤 鼠 出现逆分化（肿瘤表型） 肿瘤的抑制与正常染色体存在着相关性，正常染色体上有抑制肿瘤效应的遗传物质——TSG。 逆向发生肿瘤现象可能是杂种细胞中携带抑癌基因丢失。② Stolet和Shimizu微细胞转移实验 微细胞（含单个染色体 ） 转 移 肿瘤细胞 　肿瘤生长抑制。 证明抑制基因存在于单个染色体上，并将TSG 在染色体上定位。例 如： 肿瘤细胞 转移染色体 肿瘤生长抑制视网膜母C瘤13 +Wilms　11 +神经母细胞瘤17 + ③ 家族性癌的研究A。视网膜母细胞瘤Rb Gene 是最早发现的TSG ，证据来自于对视网膜母细胞瘤的研究。遗传型 散发型 与Knodson二次打击学说是一致的，Rb Gene缺失或功能丧失，失去对肿瘤细胞的抑制作用，认为Rb Gene 为TSG。B、Wilms 瘤在Wilms瘤患者中发现11p13-，WT1 Gene定位于11p13 区域，认为WT1为 TSG。WT1 10个外显子，50kb，传录本 3kb，编码46～49Ａa的蛋白质。Ｃ、家族性腺瘤样息肉 家族性腺瘤样息肉（familial adenomatous　polyposis－ＦＡＰ） ＦＡＰ Ｇene定位于５p２１，即ＡＰＣ基因，转录本８.4kb,编码2844Aa的蛋白 质， 其突变引起家族性腺瘤样息肉---癌。APC基因被认为是TSG。④ 杂合性丢失杂合性丢失（Loss of heterozygosity, LOH ）应用于检测、鉴定TSG 。LOH：杂合时某一等位基因片段丢失。LOH：杂合时某一等位基因片段丢失LOHPCR产物序列分析视网膜母细胞瘤的遗传分析 前三种情况（1、2和3），肿瘤组织中正常等位基因丢失（A），这称为杂合性丢失。25个遗传标记---10个病例 选择遗传标记跨基因（TSG ），遗传标记与侯选TSG 相邻，遗传标记的缺失就意味着TSG丢失。在肿瘤细胞中LOH 提示TSG 的存在，在染色体某一区域LOH频率高，可能为TSG 的侯选位点。 LOH 的方法鉴定了p53 Gene，位于17p12 APC Gene位于5q21 等 LOH MI（Microsatellite instability） N T N T LOH MI2）TSG 的功能 TSG 参与细胞周期复杂调控等，即作为一种负性调节因子（negative regulation）。其中RB基因和P53基因在细胞周期调控进展中起重要作用，它们的产物在肿瘤细胞中经常同时失活。抑癌基因的产物及功能主要包括：①转录调节因子，如:Rb、p53；②负调控转录因子，如:WT；③周期蛋白依赖性激酶抑制因子（CKI），如:p15、p16、p21；④信号通路的抑制因子，如:ras GTP酶活化蛋白（NF-1），磷脂酶（PTEN）；⑤DNA修复因子，如:BRCA1、BRCA2。⑥与发育和干细胞增殖相关的信号途径组分，如:APC、Axin等 RB Gene产物的功能 RB Gene ↓转录 mRNA ↓翻译 110kD (pRb核蛋白) ↓调控 细胞增殖 RB广泛表达，编码110Kda核蛋白pRB。对控制细胞增殖起重要作用。 Rb Gene Rb Gene 突变 Cyclin（ CDK，CKI） 磷酸化 pRb蛋白pRb蛋白 （ 激活） 去磷酸化 （失活） pRb降解（