培养基的影响及其控制.pptxVIP

第七章 发酵工程制药 第七章 发酵工程制药 第一节 概 述第二节优良菌种的选育第三节 发酵的基本过程第四节 发酵方式第五节 发酵工艺控制第六节 发酵产物的提取第七节 发酵设备第八节 基因工程菌生长代谢的特点第九节 基因工程在发酵工程中的应用第十节 发酵工程的发展展望第一节 概 述 一、发酵工程 二、发酵工程发展的4个阶段 三、发酵工程的研究内容一、发酵工程 发酵工程（fermentation engineering）又称为微生物工程，是利用微生物制造工业原料与工业产品并提供服务的技术。 现代发酵工业已经形成完整的工业体系，包括抗生素、氨基酸、维生素、有机酸、有机溶剂、多糖、酶制剂、单细胞蛋白、基因工程药物、核酸类物质及其他生物活性物质等的生产。二、发酵工程发展的4个阶段 第一阶段： 20世纪以前时期，人类利用传统的微生物发酵过程来生产葡萄酒、酒、醋、酱、奶酪等食品。 巴斯德关于发酵作用的研究，从 1857年到1876年前后持续了近20年。巴斯德以自己研究实践的科学结论说服了当时盛行的所谓“自然发生学说”，他认为：“一切发酵过程都是微生物作用的结果。发酵是没有空气的生命过程。微生物是引起化学变化的作用者”。 二、发酵工程发展的4个阶段 第二阶段： 1900~1940年期间，随着微生物培养技术的不断进步，新的发酵产品不断问世。新产品主要有甘油、乳酸、柠檬酸、丁醇和丙酮等。 二、发酵工程发展的4个阶段 第三阶段： 发酵工业大发展时期，青霉素工业化成功推动了发酵工业的发展。 主要标志有：深层培养、生产大规模化，多种抗生素、氨基酸、核酸发酵成功，甾体的微生物转化。采用纯种发酵，进行无菌操作，对操作条件有严格的控制，相应地采用较复杂的工艺和装备。 以青霉素工业生产为标志的深层通气培养法的建立标示了发酵工程发展的一次新飞跃，这一飞跃发生在1942年。 二、发酵工程发展的4个阶段 第四阶段： 基因工程等高新技术应用阶段。 分子生物学和基因工程、细胞工程等新技术的发展将进一步加深对微生物代谢产物生物合成的遗传学与调节机制的了解，从而也为这些新技术在此领域中更好地应用创造了条件。 为了提高产物的单位产量，或有可能针对解除某一“限速步骤”，提高有关生物合成酶的表达水平或改变其调节机制，大大减少传统育种方法的随机性。 在开发新品种方面，重组DNA和细胞融合技术不仅能在不同的程度上打破生物种属间的屏障，获得“杂交”分子的新产物，而且通过活化微生物的某些沉默基因，也可能获得一些新结构的活性物质。三、发酵工程的研究内容发酵工程内容： 涉及菌种的培养和选育、菌的代谢与调节、培养基灭菌、通气搅拌、溶氧、发酵条件的优化、发酵过程各种参数与动力学、发酵反应器的设计和自动控制、产品的分离纯化和精制等。 发酵工业的生产水平取决于三个要素： 生产菌种、发酵工艺和发酵设备。 第二节 优良菌种的选育 菌种选育包括自然选育、诱变育种、杂交育种等经验育种方法，还包括控制杂交育种、原生质体融合、基因工程等定向育种 方法。 一、菌种选育的物质基础 脱氧核糖核酸（DNA）是微生物遗传的物质基础。 决定遗传性状的DNA主要集中在染色体上，只有少许游离在外。DNA分子结构的改变是诱变育种的工作根据，染色体交换是杂交育种的根据。质粒也是遗传物质，它是染色体外的遗传结构。许多质粒携带一些能影响宿主细胞类型的基因，例如用来控制抗生素的形成。二、自然选育 1．自然选育的概念： 不经人工处理，利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程称 为自然选育。 2. 正变菌株： 由于微生物可以发生自发突变，所以菌种在群体培养过程 中会产生变异个体。变异个体生长良好，生产水平提高，对生 产有利，这类菌株称为正变菌株； 负变菌株： 变异个体生产能力下降，形态出现异型，生产水平下降，导 致菌种退化，这类菌株称为负变菌株。 自然选育就是将正变菌株挑选出来，进行扩大培养。 二、自然选育3. 自然选育的优点： 可以达到纯化菌种、防止菌种衰退、稳定生产水平、提高产物 产量的目的。4. 自然选育的缺点： 效率低，进展慢。三、诱变育种 用人工方法来诱发突变是加速基因突变的重要手段，它的突 变率比自然突变提高成千上百倍。突变发生部位一般是在遗传物 质DNA上，因此突变后性状能稳定地遗传。 三、诱变育种诱变育种的方法和原理 通常用物理、化学、生物等因素进行对微生物诱变，导致遗传物质DNA结构上发生变化。 （1）诱变机制 由诱变而导致微生物DNA的微细结构发生的变化，主要分为： ①微小损伤突变 ②染色体畸变即大损伤突变 ③染色体组突变三种类型。三、诱变育种 1. 诱变育种的方法和原理 （2）诱变剂 诱变剂：能诱发基