高效液相色谱柱效能的测定.pptVIP

高效液相色谱柱效能的测定 一、高效液相色谱的特点 二、 高效液相色谱法主要类型及分离原理 反相键合相色谱法 固定相：极性较小的键合固定相，如硅胶一C18H37、硅胶一苯基等； 流动相：极性较强的溶剂，如甲醇、乙睛、水和无机盐的缓冲溶液等。 三、高效液相色谱仪的流程及主要部件 2、主要部件 （1）、进样装置 使用高压定量进样阀(六通阀)进样装进样体积由定量管控制，进样准确，重现性好，适于定量分析。 柱材料:不绣钢管作为色谱柱管 柱规格:内径4.6或3.9mm,长10～50cm（实验用25cm), 粒度5～10μm （3）、检测器 一、实验目的： 1.学习高效液相色谱柱效能的测定方法。 2.了解高效液相色谱仪的基本结构及工作原理。 3.初步掌握高效液相色谱仪的操作及使用。 二、实验原理： 色谱柱的柱效能是评价色谱柱性能的一项重要指标，混合物能否在色谱柱中得到分离，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。 n=5.54(tR/Y1/2)2=16(tR/Y)2 高效液相色谱图： 数据处理： 天美LC2130 HPLC操作规程 一、开机准备 1.实验室温度应保持在25～30℃之间，湿度小于65%。 2. 根据实验要求，选择合适的色谱柱并安装，准备相应的流动相并过滤