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第1页/共18页第2页/共18页基因文库基因组文库第3页/共18页为什么要建立基因文库？直接从含目的基因的生物中提取不行吗？第4页/共18页第5页/共18页利用PCR技术扩增目的基因第6页/共18页条件：已知目的基因的核苷酸序列先加热至90－95度后降温至55－56度结果：指数式增加第7页/共18页2基因表达载体的构建－－基因工程的核心基因表达载体启动子：终止子：目的基因标记基因目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时能够表达和发挥作用第8页/共18页启动子：一段特殊结构的DNA片断，RNA聚合酶识别和结合的位点；使转录开始终止子：一段特殊结构的DNA片断，使转录停止?将生物所有DNA直接导入受体细胞不是更简单吗？如果这么做，结果会怎样？第9页/共18页3、将目的基因导入受体细胞转化？目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，受体细胞？植物细胞动物细胞微生物细胞第10页/共18页将目的基因导入植物细胞－双子叶植物 农杆菌转化法第11页/共18页将目的基因导入植物细胞－单子叶植物 基因枪法第12页/共18页将目的基因导入植物细胞－花粉管通道法转基因抗虫棉将目的基因导入动物细胞 显微注射第13页/共18页受精卵将目的基因导入微生物细胞常用的为大肠杆菌，用CaCl2处理 感受态细胞 重组载体与之混合 第14页/共18页将目的基因导入微生物细胞常用的为大肠杆菌，用CaCl2处理 感受态细胞 重组载体与之混合 第15页/共18页4、目的基因的检测和鉴定－－检查基因工程是否成功的一步A、转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因－DNA分子杂交法B、目的基因是否转录出mRNA－分子杂交法C、目的基因是否翻译成蛋白质－抗原抗体杂交个体生物学水平鉴定第16页/共18页第17页/共18页如何从基因文库中找到所需要的基因根据目的基因的有关信息基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质第18页/共18页思考与讨论作为基因工程表达载体，只需目的基因就可以完成任务吗？根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出不能导入单子叶植物的原因吗？大肠杆菌可以生产人的胰岛素，联系以前知识，结合基因工程，若要生产人的糖蛋白可以用大肠杆菌吗？
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