免疫学的检测工作和免疫学技术.ppt

实验结果 细胞凋亡的检测方法 形态学方法 生化学方法 免疫学方法 原位末端标记法 原位末端转移酶标记技术 (TdT或TUNEL) 凋亡细胞由于内源性核酸内切酶的激活, 核DNA被切割成许多双链DNA片段以及高分子量DNA单链断裂点(缺口), 暴露出大量3‘羟基末端, 如用(TdT)将标记的-dUTP进行缺口末端标记, 则可原位特异地显示出凋亡细胞。 (一)荧光标记法 * 采用美国Oncor公司ApopTag TM 试剂盒，或德国Boehringer Mannheim公司In Situ Cell Death Detection试剂盒 (二)酶标记法 * 采用美国Oncor公司ApopTagTM-Peroxidase试剂盒 检测原理及方案 末端转移标记技术检测细胞凋亡 U937细胞（荧光素染色） 末端转移标记技术检测细胞凋亡 大鼠脊髓（PI染色，双染法 ） FACS检测末端标记的U937凋亡细胞 杂交瘤技术原理 Knock out 技术 用Knock out 技术挑选小鼠重组ES细胞 纯合子Knock out 小鼠的获得 原位杂交技术挑选特异性cDNA克隆 转基因小鼠流程图 Western blot Sourthern blot 免疫血清电泳 扫描电镜观察补体的溶解作用 FACS 技术分析 单克隆抗体的制