第二章 分离方法.pptVIP

薄层色谱(Thin Layer Chromatograph) 高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography, HPLC) 举例 苯和环己烷的沸点只差0.6摄氏度，用分馏的方法是根本不可能的。但是用气相色谱法，只用半米长的色谱柱，就可以把两者轻易分开。 这是因为苯和环己烷在丁二酸乙二醇聚酯固定相上的分配系数有很大的差别，所以分配系数的差异是所有色谱分离的实质性的原因。 固定相：Stationary phase 流动相：Mobile phase 当K=1时，组分在固定相和流动相中浓度相等； 当K1时，组分在固定相中的浓度大于在流动相中的浓度； 当K1时，组分在固定相中的浓度小于在流动相中的浓度。 不同物质的分配系数相同时，它们不能分离。 色谱柱中不同组分能够分离的先决条件是其分配系数不等。 分配系数K小的组分：在固定相中停留时间短，较早流出色谱柱。 分配系数大的组分：在气相中的浓度较小，移动速度慢，在柱中停留时间长，较迟流出色谱柱。 两组分分配系数相差越大，两峰分离的就越好。 分配系数和分配比比较 分配系数、分配比都与组分及固定相的热力学性质有关，随柱温及柱压的变化而变化； 分配系数仅与组分及两相的性质有关，而分配比则还与相比有关，也就是随固定相的量而变化； 对于一个给定的色谱体系，各组分的分离取决组分在两相间的相对量，而不是相对浓度。 根据上述假定，在色谱分离过程中，该组分的分布可计算如下： 开始时，若有单位质量，即m=1（例1mg或1μg）的该组分加到第0号塔板上，分配平衡后，由于k=1，即ns=nm故nm=ns=0.5。当一个板体积（lΔV）的载气以脉动形式进入0号板时，就将气相中含有nm部分组分的载气顶到1号板上，此时0号板固相中ns部分组分及1号板气相中的nm部分组分，将各自在两相间重新分配。故0号板上所含组分总量为0.5，其中气固两相各为0.25而1号板上所含总量同样为0.5．气固两相亦各为0.25。以后每当一个新的板体积载气以脉动式进入色谱柱时，上述过程就重复一次(见下表)。 同理有效塔板高度为： HPLC与经典LC区别 HPLC的基本原理和分类 三、特点及应用 缺点: （一） 热导检测器(TCD) 影响检测器灵敏度的因素： （1）热丝温度（检测器温度），热丝工作电流增加1倍，灵敏度提高3～7倍，但电流过高，造成基线不稳并缩短热丝的寿命。一般桥电流控制在60~100mA。 （2）载体种类：载气与试样热导系数相差越大灵敏度越高。一般H2、He好，N2不好。 （3）载气纯度：载气纯度高，灵敏度高。例如将98～99%的H2改为99.999%的，灵敏度将提高13%。 1.特点 优点： 1）专属型检测器（只能测含碳氢化合物）； 2） 灵敏度高（比 TCD高100～1000倍） ； 3） 稳定性好温度（温度不是主要影响因素，80~200℃灵敏度几乎相同）、响应快。 缺点： 1)样品被破坏，无法回收； 2)不能检测水、空气、CO、CO2、SO2等； 3)对含羰基、羟基、卤代基和胺基的有机物灵敏度很低或根本无响应。 （二） 氢火焰离子化检测器(FID) 火焰离子化机理： 通常认为是化学电离过程： 有机物燃烧产生自由基，自由基与O2作用产生正离子，再与水作用生成H3O+。 以苯为例： 2.结构及原理 主要是离子室 离子室包括: 气体入口 火焰喷嘴 收集极(+) 极化极(-) FID需要的气体： N2 ：载气 H2 ：燃气 空气：助燃气 原理 有机化合物→离子化→离子流→流向阴、阳极→放大→记录 （三）电子捕获检测器(Electron capture detector, ECD) 1）对如卤素基、过氧基、醌基、硝基等含电负性的功能团的分子具有极高的选择性和灵敏度；但对含酰胺基和羟基的化合物以及烃类物质不灵敏。 2）与FID相比，ECD对样品的破坏不大。 3）要求载气纯度要高(99.99%)。 特点： （四）火焰光度检测器(Flame photometric detector, FPD) 1）对含S、P化合物有较高灵敏度和一定的选择性，因此，也称硫磷检测器。主要用于SO2、H2S、石油精馏物的含硫量、有机硫、有机磷的农药残留物分析等。 2）相对其它检测器如ECD和FID，FPD价格较贵。 特点： 常用气相色谱检测器性能 选择型 选择型 选择型 通用型 通用型 选择型 含S、P有机物 含电负性物质 含碳有机物 无机物、有机物 适用范围 质量 浓度 质量 浓度 类型 FPD ECD FID TCD 二、气相色谱固定相 1. 固体固定相 气