演示版HPV基因分型检测试剂盒常见问题培训.pptVIP

临床试验操作注意事项 ——PCR扩增 尽可能使用带有滤心的长头移液器枪头 防止形成气溶胶 防止样本DNA交叉污染 防止样本污染试剂 精品课件 * 临床试验操作注意事项 ——PCR扩增 防止造成试剂被污染 移液枪头均为一次性用品,切忌重复使用 移液枪头尽可能为带有滤芯 每个区域必须用专用仪器、耗材。 进入不同房间必须穿专用工作服及带手套，离开时必须先脱去工作服及手套。 PCR后操作区域房间内的所有耗材及仪器均不能与PCR前区域混合使用。 使用前后均以次氯酸消毒液清理。 精品课件 * 临床试验操作注意事项 ——PCR扩增 HPV 58 HPV 18 HPV 16 PCR操作不当造成污染： 精品课件 * 临床试验操作注意事项 ——导流杂交 杂交及杂交后清洗溫度（45?C ）。 每次清洗膜后，抽液干净。 确保PCR产物变性成功。 遵守封阻反应温度及时间、酶标反应时间及显色反应时间，确保杂交结果背景正常。 正确使用移液器，移液枪及枪头专用。 精品课件 * HPV基因分型检测试验项目 ——临床试验结果分析及常见问题 精品课件 * 基因扩增检验实验室工作流程 进入各个工作区必须遵循严格的单一方向顺序! 精品课件 * 最佳的HPV基因分型实验室布局 出口 入口 工作流向 临床 样本 收集 与 储存 PCR前区域 PCR后区域 精品课件 * 最佳的HPV基因分型实验室布局 每间房间必须有其专用的工作服及一次性手套； 每个工作区都应有独立的一套仪器设备及耗材； 不同区域的仪器设备及耗材不能混用; 临床样本 (原始容器中) 样本制备区 试剂准备区 超净工作台 DNA 提取 PCR 扩增区 导流 杂交区 结果通知患者 精品课件 * 基础HPV基因分型实验室布局（1） 临床样本 (原始容器中) 样本制备区 超净工作台 DNA 提取 导流 杂交区 结果通知患者 PCR区域 精品课件 * 基础HPV基因分型实验室布局（2） 每个区域必须有其专用的工作服及一次性手套；每次操作必须更换； 涉及到公用仪器使用，必须注意防止交叉污染，定时使用次氯酸钠溶液擦洗； 精品课件 * 实验室环境注意事项 工作区域必须始终保持清洁整齐； 所有实验台面及地面均应保持清洁； 所有实验废料及垃圾使用专用垃圾带装好后，封口处理； 在每次工作前后对工作台面进行消毒液（次氯酸溶液）擦洗、消毒酒精擦洗工作，并在完成工作后开启紫外灯进行灭菌； 精品课件 * 实验室制度及人员配备 有效的临床结果 严格规章制度 并遵守 操作人员具有 专业技术知识 和经验 强烈责任感 工作态度 认真细心 严格遵守 HPV基因分型 各项工作的 标准操作规程 精品课件 * 实验所需仪器 HybirMax?医用核酸 分子快速杂交仪 PCR扩增仪 超净工作台 水浴锅 离心机 旋涡混合仪 微量移液器 精品课件 * HPV基因分型检测试验项目 ——HPV临床样本的采集方法及注意事项 精品课件 * HPV临床样本的采集方法及注意事项 标本收集 标本保存 精品课件 * 标本收集 检查前告知病人注意事项： 月经正常妇女，在月经来潮后10～18天为最佳检查时间。 检查前48小时内不要作阴道冲洗，不要用避孕药膏等阴道内用药物。 检查前48小时最好不要行性生活。 检查前不进行醋酸或碘液涂抹。 精品课件 * 标本收集  步骤－ 先脱掉裤子，然后按医生指示仰卧于一张检查床上。 步骤二 由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈。 然后使用专用的HPV采样刷置于宫颈口采集标本。（最好在取样前先用棉签擦去宫颈分泌物） 精品课件 * 标本收集 步骤四 慢慢取出宫颈刷，将其放入标有病人编号的取样管中，取样管内已加有专用细胞保存液，折断其刷头入管中，拧紧瓶盖。 步骤三 将专用宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5圈。 精品课件 * 标本保存 样本一经采集，则应尽可能快的送至检测实验室。 如若不能马上送检样本，请于4℃保存，请在2个星期之内进行检测。 精品课件 * 标本收集 标准收集中注意事项： 使用凯普专用取样器及保存液，可抑制细菌生长，保持DNA完整性。 样本收集中为保留足够的宫颈细胞标本，注意切勿将宫颈刷头丢弃。 宫颈保存系统包装打开后，必须立即进行采样，并连同刷头置于取样管中。 如果同时进行细胞学检查，应先采细胞学样品。 宫颈刷头折断