基因工程的工具（教案）.docVIP

江苏省南通第一中学高三生物导学案·§15—1 重组DNA技术的基本工具 班级_____________姓名_______________ §15—1 重组DNA技术的基本工具 【学习目标】1.简述基因工程的概念含义；2.简述基因工程诞生历程；3.说出DNA重组技术的基本工具及其作用、特点。 考点一：基因工程的基本原理和理论基础 1、基因工程的概念 （1）概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 （2）原理（变异的来源）：基因重组 （3）操作层次：分子水平上的操作，细胞水平上的表达。 （4）育种优势： ①与杂交育种相比，能克服远缘杂交不亲和的障碍（因为基因工程是将一种生物的优良基因转移另一种生物体内，而不同种生物之间存在生殖隔离）；育种周期短。 ②与诱变育种相比，能定向改变生物的遗传性状。（因为基因突变是不定向的；通过基因工程的方法能创造出人们所需要的新的生物或生物产品，但不一定是对人类或受体有利的，如生物武器对人类有害、利用大肠杆菌生产人的胰岛素对大肠杆菌无益） 2、基本原理和理论基础 外源基因在受体 外源基因在受体 细胞内的表达 基因是控制生物性状和遗传的基本单位 遗传信息的传递都遵循中心法则 生物界共用一套遗传密码 重组DNA： 载体+目的基因 转录 mRNA 翻译 蛋白质（性状） 基因拼接 DNA的基本单位都是四种脱氧核苷酸 DNA分子都遵循碱基互补配对原则 DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构 考点二：基因工程的基本工具 （1）限制性核酸内切酶（简称“限制酶”）： ①来源：主要来自于原核生物，种类多 ②功能： 主要切割外源DNA，而对本身的DNA不起作用，达到保护自身的目的。 ③特性： 具有专一性，只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（注意：断开一条链上两核苷酸之间的磷酸二酯键，而不是互补的两个核苷酸之间的氢键）。 ④结果：形成黏性末端或平末端。 例1：限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。 ①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 ②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 变式训练:1．（多选）某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序列，用该限制酶切割该DNA分子，可能形成的两个DNA片段是 （CD） 提高练习1.限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列和切割位点。切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是 （C） Bam BamHⅠ ↓ EcoRⅠ ↓ Hind Ⅲ ↓ BglⅡ ↓ ↑ GGATCC GAATTC AAGCTT AGATCT CCTAGG CTTAAG TTCGAA TCTAGA ↑ ↑ ↑ A.BamHⅠ和EcoRⅠ B.BamHⅠ和 Hind Ⅲ C.BamHⅠ和BglⅡ D.EcoRⅠ和 Hind Ⅲ 提高练习2．现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnⅠ单独酶切后得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是 （D） （2）DNA连接酶： 常用类型 E.coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 功能 连接黏性末端 连接黏性末端或平末端 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 特性 对所连接的DNA两端碱基序列没有专一性要求 【思考讨论1】DNA连接酶与DNA聚合酶有什么异同？ 相同：化学成分都是蛋白质；都能催化两个核苷