基因工程及其应用--灵芝11.pptVIP

* * * * 谁能告诉我这是what ？ 能发光的水母 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 基因工程及其应用 第1课时 基因工程的原理 授课教师：杨灵芝 一、基因工程(gene engineering) 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 原理 操作环境 操作水平 结果 基因重组 生物体外 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 1、基因的 指“ 限制性核酸内切酶 ” 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 特点: “ ” 这个特点说明了： 酶具有专一性 二、基因操作的工具 点击播放 例：大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别 GAATTC序列，并在G和A之间切开。 　　被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？ 思考: 这些黏性末端碱基是反向对称重复排列的 ２、基因的针线──DNA连接酶 　　连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 DNA连接酶的作用过程 点击播放 3、基因的运输工具——运载体 （1）常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒等 标记基因，便于进行检测。 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　 （3）作为运载体必须具备哪些条件？ 1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3）具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 ①将外源基因转移到受体细胞中去 ②利用运载体在受体细胞内对外源基因进行大量复制 （2）运载体的作用： 从细胞中分离出DNA 从大肠杆菌中提取质粒 限制酶 提取目的基因 限制酶 目的基因与运载体结合 DNA连 接酶 目的基因导入受体细胞 目的基因的表达与检测 基因工程操作的基本步骤 例：将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法 特点: 能感染双子叶植物和祼子植物,对单子叶植物无感染能力 Ti质粒的T—DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上 转化过程: Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入 植物细胞 插入 植物细胞染色DNA 表达 新性状 转入 农杆菌 为什么基因工程能够成功呢？ 基因拼接的理论基础： 规则的双螺旋结构 基本单位都是脱氧核苷酸 遵循碱基互补配对原则 外源基因在受体内表达的理论基础： 生物界共用一套遗传密码 1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制性酶 2.基因的针线 ——ＤＮＡ连接酶 3.基因的运输工具 ——运载体 基因工程的操作步骤 1.提取目的基因 2.目的基因与运载体结合 3.目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 基因工程的原理: 基因重组 谁能告诉我这是what ？ 培育转基因大肠杆菌的简要过程： 你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些？ 普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素) 人体组织细胞 提取 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 大肠杆菌(含胰岛素基因) 转基因大肠杆菌 (能分泌胰岛素) 1.ONE 胰岛素基因从人体细胞内提取出来 2.TWO 胰岛素基因与运载体DNA连接 3.THREE 胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运载体 培育转基因大肠杆菌的关键步骤：