动物毒理学第五章 外源化学物的一般毒性作用-pdp.ppt

（五）观察指标 观察指标的选择 根据急性毒性试验、蓄积毒性试验提供的数据 参考有关文献资料 参考同系物毒性资料 通常包括 一般性指标 生理生化指标 组织病理学检查 特异性指标 一般性指标 中毒症状 包括食欲、活动、被毛、分泌物、呼吸、神态、行为等 体重 综合毒性指标 水和饲料摄入量 体重（g) 饲料利用率= ×100% 耗饲量（g） 如果化学毒物影响食欲，则每日进食量减少，体重增长会受影响，但饲料利用率不一定改变。 如果化学毒物干扰了食物的吸收或代谢，虽然不一定影响食欲，但体重增长却减慢，因而饲料利用率也会有改变。 生理生化指标 肝脏功能 天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆红素、总胆固醇等。 肾脏功能 血清尿素氮、血清非蛋白氮、肌酐等。 血液学指标 主要检测指标有红细胞或网织红细胞计数、血红蛋白含量、白细胞计数及其分类计数、血小板含量以及凝血时间等。 病理学检查 尸检 特别注意与试验过程中的中毒表现有关的器官、受试物可能直接接触的器官和代谢和排泄器官 脏器系数 又称脏/体比值，指某一脏器湿重在每100g体重中所占的质量。 脏器湿重（g） 脏器系数= ×100% 单位体重（g） 对照组和高剂量组动物以及尸检异常者要详尽检查，其它剂量组仅在高剂量组动物检查出现异常时才进行检查。 包括：肾上腺、胰腺、胃、十二指肠、回肠、结肠、垂体、前列腺、脑、脊髓、心脏、脾脏、胸骨（骨和骨髓）、肾脏、肝脏、肺脏、淋巴结、膀胱、子宫、卵巢、甲状腺、胸腺、睾丸（及附睾）以及视神经等。 组织学检查 特异性指标 可以反映受试物的中毒特征 有助于取得中毒机制的线索 特异性指标的选择依据： 急性、亚急性毒性的中毒表现 受试物的化学结构及其特殊的化学基团 三、慢性毒性试验设计 （－）实验动物 （二）实验动物的饲养管理 （三）染毒途径 （四）染毒剂量及分组 （五）染毒时间 （六）观察指标 （－）实验动物 品系 最好选用纯系动物，并将同窝动物均匀分配到各试验组和对照组。 种属 一般要求选用两种，即啮齿类和非啮齿类，目前已掌握大鼠和小鼠各品系的特点及对诱发肿瘤的敏感性，故可优先将其用于慢性毒性和致癌试验。 非啮齿类动物多选用犬或猴。对活性不明的受试物，则应选用两种性别的啮齿类和非啮齿类动物，宜选择低癌系的敏感动物进行致癌试验。 （－）实验动物 性别 一般要求雌雄各半 年龄 初断乳的大鼠或小鼠，体重 大鼠50~70 g (出生3~4周） 小鼠体重10~15 g (出生3周) 狗4~6月龄 动物数 小鼠60只或更多/组 大鼠40~60只/组 犬、猴等8~10只/组 如计划在试验过程中定期剖杀动物，试验结束时应满足所得数据符合统计学处理的要求。 （二）实验动物的饲养管理 所用饲料应能满足实验动物营养的需要。严格控制有毒、有害物质对饲料的污染。 每周至少要更换新鲜垫料两次。 动物饲养房中不得使用消毒剂、杀虫剂等药物。 一间动物饲养房内不得饲养两种实验动物；不能同时进行两种受试物的毒性试验。 试验期间，动物最好采用单笼饲养，且要求各组动物饲养条件（笼具、温度、光照、饲料等）严格一致。 （三）染毒途径 原则：与人类和靶动物实际接触或相近的途径 经消化道 混饲或混饮 非营养性受试物加入饲料中的比例不得超过饲料的5％ 等量递加法：配制饲料，保证受试物混匀 经呼吸道染毒 每日的染毒时间： 工业毒物4～6 h，环境污染物8 h 一般每周染毒5～6 d。 （四）染毒剂量及分组 依据 ①亚慢性毒性试验的阈剂量或NOEL ②人群或靶动物期望接触的剂量 理想的剂量 ①反映受试化学物的剂量-反应关系 ② 求出NOAEL ③最高剂量组能观察到某些毒作用所致的变化 染毒剂量选择的3种方法（1） 以亚慢性阈剂量为依据 高剂量 1/2~1/5 亚慢性阈剂量 中剂量 1/50~1/10 亚慢性阈剂量 低剂量 1/100 亚慢性阈剂量 以LD50值为依据 最高剂量 1/10 LD50 预期慢性阈剂量 1/100 LD50 无作用剂量 l/1000 LD50 以MTD（最大耐受量）为依据 0.125 MTD 0.25 MTD 染毒剂量选择的3种方法（2） （五）染毒时间 WHO建议 小鼠18个月 大鼠