临床检验仪器学-—广医电泳技术课件.ppt

25 ° C 35 ° C 随着温度的升高，分子变得紊乱，伴随着也降低了系统的灵敏度，因为图谱是圆滑的，并且小蛋白条带消失了。 如果毛细管运行的温度设置在20℃，那么所有的样本都会报警。 * 能够完美地区分健康人群和病态人群 如果一个测试能够达到100%的诊断灵敏度和特异性，那么我们就认为它是金标准。 * 结论 第一：患者有益，避免伤害 第二：符合第一，遵守规则 第三：即要生存，也要原则 通过本课内容，我们对全自动琼脂糖凝和毛细管方法可以了解到，自动化与非自动化各有各的优势与缺陷，但我们要以对人类健康最有益的方法为前提选择？ * 第十六章 临床电泳分析仪 单击此处添加副标题 主讲人：张玲 广州金域医学检验中心 教学目的与要求 【掌握】 电泳的基本原理、影响因素、技术指标 掌握毛细管电泳的基本工作原理和分离模式 【熟悉】 常用的电泳技术和电泳方法 熟悉毛细管电泳仪的基本结构 【了解】 常用电泳设备的基本结构，临床应用，质量控制 内容提要 第一节 电泳原理 第二节 常用电泳方法 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标 第四节 常用电泳仪简介 第五节 毛细管电泳基本结构和分离模式 第六节 电泳仪的维护保养及故障排除 第七节 电泳仪的临床应用 电泳发展史 1937年瑞典Tisehus A（区带电泳）， 1960年以前：多采用醋酸纤维素薄膜 1960年至1980年：琼脂糖凝胶 1981年至1990年：推出可见光/荧光双系统自动电泳扫描仪 1991年至今：自动化程度日益提高 目前，电泳技术广泛用于蛋白 质、多肤、氨基酸、核普酸、无机离子等成分的分离和鉴定，还用于细胞与病毒的研究。 电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。 电泳技术（electrophoresis technique）是指利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术。 电泳仪（electrophoresister）是指可以实现电泳分离技术的仪器。 概述 电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相 等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子），不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，因此可使它们分离。 第一节 电泳原理 一、影响电泳的外界因素 （一）电场强度 （二）溶液的pH值 （三）溶液的离子强度 （四）电渗作用 （五）粒子的迁移率 （六）吸附作用 第一节 电泳原理 二、电泳仪的主要技术指标 1． 输出电压 2． 输出电流 3． 输出功率 4． 电压稳定度 5． 电流稳定度 6． 功率稳定度 7． 输出组数 8． 连续工作时间 9． 保护措施 10． 显示方式 11． 定时方式 12． 电源电压 13． 电源频率 14． 功耗 第一节 电泳原理 三、全自动琼脂糖电泳仪 全自动琼脂糖电泳仪，有可见光单系统，使用琼脂糖凝胶电泳胶片。灵敏度高，可适用于低浓度蛋白检验，如尿蛋白、脑脊液蛋白、同工酶的分离。但其自动化程度较差。 由于这类电泳仪所能做的项目较多，且灵敏度较高，仍为许多实验室所接受。 全自动电泳分析系统 全自动电泳分析系统，仪器自动点样、电泳、呈色（或染色、脱色）、烘干，自动化程度非常高。可用各种电泳片，包括琼脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等，采用可见光及荧光呈色双系统，是一种较理想的电泳仪。 阳极 阴极 Trf Alb ? 电渗电场 电场 琼脂糖系统的原理 * 五、毛细管电泳的特点 1. 高灵敏度 2. 高速度 3. 高分辨率 4. 样品少 5. 自动化程度高 6. 应用范围广 第一节 电泳原理 四、毛细管电泳的基本工作原理 溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力，沿毛细管通道，以不同速度向与其所带电荷相反的电极方向迁移，并依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异 而实现分离。 第一节 电泳原理 阳极 电渗 阴极 电场 蛋白迁移方向 蛋白移动的方向不同！ 琼脂糖电泳移动方向：从阴极到阳极 毛细管电泳移动方向：从阳