临床生化检验— 第十二章 糖代谢紊乱的生物化学检验.ppt

原理：样本中的HbA1c和抗HbA1c抗体反应生成可溶性的抗原—抗体复合物，过剩的抗HbA1c抗体与多聚半抗原生成不溶性的抗体-多聚半抗原复合物，用比浊法进行测定，计算HbA1c的百分比 3. 免疫化学法 方法：硝基四氮唑盐(NBT)还原法和酶法，NBT法因易受pH、反应温度和还原性物质的影响，目前已少用 酶法原理：用蛋白酶将GSP水解为GSP片段，再利用酮胺氧化酶(KAO)裂解葡萄糖与氨基酸残基间的酮胺键，并有H2O2生成，通过过氧化物酶指示测定GSP浓度 方法评价：特异性较高、干扰少、线性宽，是理想的GSP测定方法 （二）糖化血清蛋白测定 酶法原理：在样本(血清或血浆)中加入酮胺氧化酶，将内源性糖化氨基酸变成葡萄糖酮醛、氨基酸和过氧化氢而除去。然后加入对清蛋白有特异性的蛋白酶，使GA生成糖化氨基酸，再在糖化氨基酸氧化酶作用下生成葡萄糖酮醛、氨基酸和过氧化氢，后者发生Trinder反应，此化合物的生成量与GA含量成正比 方法评价：尿酸、维生素C、胆红素、四环素和谷胱甘肽等可与色原性物质竞争过氧化氢，产生竞争性抑制，使测定结果偏低 （三）糖化血清清蛋白测定 胰岛素原的测定方法有RIA、ELISA等免疫化学方法。胰高血糖素、肾上腺素、生长激素、生长抑制素、皮质醇、甲状腺激素及胰岛素样生长因子的测定也多用免疫化学方法 三、血糖调节物的测定与评价 临床常用乳酸脱氢酶法测定乳酸，反应式如下： 本法操作简单，特异性高。标本采集时需做相应处理 （一）乳酸测定 四、糖尿病并发症相关指标的测定与评价 丙酮酸测定正好是利用乳酸测定的逆反应，反应式如下： 本法特异性较高，适用于各种自动分析仪。 血中丙酮酸极不稳定，血液抽出后1min就见减低，采血后应立即加入到偏磷酸沉淀蛋白液中，标准液必须新鲜配制 （二）丙酮酸测定 胰岛自身抗体大多用免疫化学方法检测，包括： 胰岛细胞胞浆抗体（ICA） 胰岛素自身抗体（IAA） 谷氨酸脱羧酶自身抗体（GADA） 酪氨酸磷酸酶抗体/胰岛抗原2抗体（IA–2A） 五、胰岛自身抗体的测定 IR是MS中多种表现的共同发病基础，其测定方法已有20多种，目前常用的方法有 1．葡萄糖胰岛素钳夹技术（CLAMP）是目前国际公认的评价IR金标准。该方法复杂、价格昂贵、费时，设备特殊，限制了在临床上推广和使用 2．胰岛素敏感指数（ISI） 计算法ISI=1/（空腹血糖×空腹胰岛素），ISI低说明存在IR 3．胰岛素抵抗指数（IRI）采用稳态模型（HOMA Mode1）公式计算。Homa-IRI=（空腹血糖×空腹胰岛素）／22.5，IRI高说明存在IR 胰岛素抵抗的测定与评价 糖尿病的检验指标在糖尿病的诊断、分型、疗效评估、并发症诊断和鉴别诊断上有重要意义 分以下两方面内容阐述： 一、糖尿病的诊断标准 二、糖代谢紊乱指标的临床应用 第三节 糖代谢紊乱指标测定的临床应用 项目 1999年WHO标准 2014年ADA标准 备注 随机血糖 ≥11.1mmol/L ≥11.1mmol/L， 并有糖尿病症状（如多食、多饮、多尿、体重减轻）无明确的高血糖，结果应重复检测确认 FPG ≥7.0mmol/L ≥7.0mmol/L 空腹的定义是至少8h无热量摄入 OGTT 2h≥11.1mmol/L 2h≥11.1mmol/L 试验应按世界卫生组织（WHO）的标准进行，用相当于75g无水葡萄糖溶于水作为糖负荷 HbA1C 无此项 ≥6.5% 试验应该用美国糖化血红蛋白标准化计划组织（NGSP）认证的方法进行，并与糖尿病控制和并发症研究（DCCT）的检测进行标化 说明 其中任何一种出现阳性结果，需用上述方法中的任意一种进行复查，予以证实，诊断才能成立 直接诊断 mmol/L转换mg/dl乘以系数18 （四）糖尿病诊断标准 （一）糖尿病诊断标准 ADA 2014年糖尿病诊疗标准执行纲要 中华医学会《妊娠合并糖尿病诊治指南(2014) 》 在有危险因素的个体，首次产前就诊时用标准的诊断方法筛查未诊断的2型糖尿病。 ②在无糖尿病史的孕妇，妊娠24~28W筛查GDM。 ③妊娠糖尿病的妇女在产后6~12W用OGTT及非妊娠糖尿病诊断标准筛查永久性糖尿病。 ④有GDM病史的妇女应至少每3年筛查是否发展为糖尿病或糖尿病前期。 ⑤有GDM病史的糖尿病前期妇女，应接受生活方式干预或二甲双胍治疗以预防糖尿病。 推荐医疗机构对所有尚未被诊断为PGDM或GDM的孕妇，在妊娠24-28W以及28W后首次就诊时行OGTT。 孕妇具有GDM高危因素或者医疗资源缺乏地区，建议妊娠24-28W首先检查FPG。FPG≥5.1mmol/L，可以直接诊断GDM，不必行OGTT；FPG4.4mmol/L(80mg/dl)，发生GDM可能性极小，可以暂时不