植物生理学实验植物组织中硝态氮含量定量测定.pptVIP

植物体内硝态氮含量的测定 ;一 测定意义：; 人体摄入的硝态氮81.2％来自蔬菜，当人摄取得硝酸盐量较大时，体内的NO3－还原成NO2－进入血液，将血液中的血红素变成高铁蛋白，引起肌体中毒。NO2－还可以间接与次级胺结合形成强制癌物质－亚硝胺。 咸菜的腌制初期咸菜内会大量积累硝酸盐，硝酸盐含量升高数倍或数十倍，当咸菜腌制成熟后硝酸盐含量减少（很低），所以，咸菜没有腌制完成之前，不要食用。 青菜放置时间延长一天，体内的硝酸盐含量会不断增加，购买蔬菜后及时食用，不要放置时间过长，减少硝酸盐的积累。 ;二 测定原理：水杨酸法 ;小白菜：绿叶片、叶柄 两个小组合作，一个小组测叶片，另一个小组测定叶柄。 二者必须是同几株上的材料。 ;四、 操作步骤：;冲洗残渣，定容;样品液的测定 比色;;式中：C－标准方程计算得NO3-－N浓度 V—提取样品液总量 W—样品鲜重; 1、实验中使用强酸、强碱，一定要注意安全，防止倒在实验台、地面、仪器内，防止撒到衣物上，如果发生意外及时用水冲洗和擦洗。 2、各个小组使用的试管自己洗刷一遍，防止前一个班使用后洗刷不干净，重复间误差较大。 3、吸取0.1ml的样品液一定要准确，溶液加到底部，否则影响到结果的重复性。 4、两组合作进行不同部位的测定，比色测定时必须用同一台分光光度计。 ; 5、分光光度计：倒液不超过比色杯2/3；推拉杆要轻避免液体溅出；比色杯用擦镜纸擦净；用完后及时洗净。 6、加水杨酸—浓硫酸时，在瓷盘中加，不要滴到外面。若滴出，尽快用水冲洗擦净。加完浓硫酸的移液管立即冲洗，放回试管架。 7、废液（因含浓酸、碱）倒在专门收集容器内，切勿倒入水池内！！！; 8、测定结束后，将试管彻底洗刷干净（因含强碱），倒置在试管架上。 9、值日生负责注意清理分光光度计、比色皿、台面的清洗。;;光照能促进硝酸盐还原过程 ①光下植物通过光合作用合成的糖流出叶绿体后，经糖酵解产生NADH而用于NO3- 还原。 ②光能促进底物对NR的诱导，在一定范围内，NR活力随光强的增加而升高，光下生长的植物体内NR水平要比暗中生长的高得多。 ③光合作用光反应中形成的NADPH和还原型铁氧还蛋白(Fd)可转化成NADH为硝酸还原提供还原力。 ④光反应中形成的还原型铁氧还蛋白可直接用来还原亚硝酸进而促进NO3 - 还原。