高考冲刺 专题五 基因工程与克隆技术.pptxVIP

限制酶DNA 连接酶载体作用切割________和载体拼接DNA 片段，形成_________携带目的基因进入_____________目的基因受体细胞重组DNA作用部位两个核苷酸之间的___________磷酸二酯键限制酶DNA 连接酶载体作用特点(条件)①识别双链DNA 分子的某种_____________________②在特定位点上切割①E·coli DNA 连接酶只能连接_____________________②T4 DNA 连接酶能连接_________和平末端①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制②有多个_______________________③具有特殊的____________黏性末端特定核苷酸限制酶切割位点序列黏性末标记基因端常用类型EcoR Ⅰ 限制酶 Sma Ⅰ 限制酶E·coli DNA 连接酶、T4 DNA 连接酶质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等方法具体操作基因文库直接分离从自然界已有的物种中分离，如从_________中获取较小基因人工合成化学合成已知核苷酸序列的 ，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板逆转录酶反转录法以RNA为模板，在 作用下人工合成PCR技术扩增目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在____________作用下延伸DNA聚合酶植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法__________法、基因枪法、___________法_________技术___________法(用Ca2＋处理)农杆菌转化感受态细胞花粉显微注射管通道受体细胞受精卵、体细胞_________原核细胞受精卵项目植物组织培养动物细胞培养取材植物幼嫩部位动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程项目植物组织培养动物细胞培养结果获得植株个体，可以体现全能性新的细胞，不形成个体，不体现全能性条件①无菌②营养③适宜条件①无菌、无毒②营养，血清等③温度和pH④气体环境：O2、CO2应用①植株快速繁殖②脱毒植株的培养③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学的研究植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的 _______、细胞的_______细胞膜的_______流动性流动性全能性 过程植物体细胞杂交动物细胞融合相关酶纤维素酶和________________或胶原蛋白酶果胶酶 胰蛋白酶 融合方法物理法：离心、电激、振动；化学法：聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外还可以用___________诱导灭活的病毒 结果杂种植株杂交细胞 意义克服了远缘杂交的__________，获得杂种植株突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能不亲 和性 THANKS!谢谢观看