2020届高考艺考生物复习专题强化练：十六 专题九 第15讲 基因工程和细胞工程 .docVIP

一、选择题 1．某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题： (1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有________________________(答出两点即可)。 而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是________；并且________和________的细胞也是不能区分的，其原因是________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有________的固体培养基。 (3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于________。 解析：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有：能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点等。(2)依题意可知，目的基因插入后，导致四环素抗性基因(Tetr)失活，而氨苄青霉素抗性基因(Ampr)仍能行使正常功能。如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞，因二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长，所以是不能区分的；含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞，因二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都能生长，因此也是不能区分的。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有四环素的固体培养基；因目的基因插入后，导致四环素抗性基因(Tetr)失活，含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌在该培养基中不能生长，而含有质粒载体的则能正常生长。(3)噬菌体是专门寄生在细菌细胞中的病毒，在侵染细菌时，噬菌体的DNA进入到细菌细胞中，而蛋白质外壳仍留在细胞外；在噬菌体的DNA的指导下，利用细菌细胞中的物质来合成噬菌体的组成成分。据此可推知：基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于受体细胞。 答案：(1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可) (2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长　含有质粒载体　含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)　二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长　四环素　(3)受体细胞 2．研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答相关问题： 注：HindⅢ和ApaLⅠ是两种限制酶，箭头表示酶的切割位点。 (1)利用PCR技术扩增目的基因的原理是____________。图1中引物为单链DNA片段，它是根据________的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测，第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。 (2)图2所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5—磷酸脱羧酶，该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5—磷酸脱羧酶，就无法生长，除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为________基因来筛选转化成功的酵母菌，要选择________的酵母菌作为受体细胞，所使用的培养基________(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。 (3)奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中，________(填“能”或“不能”)选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶，原因是_______________________________。 答案：(1)DNA双链可进行复制　目的基因　3/4　(2)标记　缺乏URA3基因(或不能合成乳清苷5-磷酸脱羧酶)　不需要　(3)不能　大肠杆菌无内质网和高尔基体(或大肠杆菌无法对蛋白质进行加工和修饰) 3．真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示基因文库的制备和从基因文库中提取胰岛素基因的过程。请回答下列问题： (1)从基因结构分析，与基因组文库中的基因相比，从cDNA文库中获得的目的基因缺少的结构______________________(至少写两个)等。图中①过程中存在的碱基配对方式有______________________(模板上的碱基在