HPLC法对贺兰山东麓干红葡萄酒中酚类物质的测定与分析.docxVIP

HPLC法对贺兰山东麓干红葡萄酒中酚类物质的测定与分析 和代写行政管理论文服务]2.2 花色苷的测定2.2.1 花色苷HPLC分析方法的对比选择每种分析方法的分离结果分别如图2所示。对比图2中的方法1与方法2色谱图可以看出，方法2中出现的杂峰比方法1多，且出峰时间漂移，不稳定，图中花翠素单葡萄糖苷与花青素单葡萄糖苷没有得到较好的分离，再对比方法1与方法3色谱图，发现方法3的出峰时间较稳定，整体的分离效果较好。所以，方法3的出峰时间最稳定，整体分离效果最好，可以确定为测定葡萄酒中花色苷酚的最佳HPLC分析方法。2.2.2 标准曲线的制作利用最佳HPLC方法对不同浓度梯度的二甲花翠素单葡萄糖苷标准溶液进行液相分析，以质量浓度Y为纵坐标，峰面积X为横坐标，计算得到二甲花翠素单葡萄糖苷的标准工作曲线为y=0.0510x-0.6148，R 2 为0.9995，相关性良好。2.2.3 葡萄酒样花色苷的定性分析依据文献 [10-11] 的方法计算花色苷的相对保留时间，公式为：alpha;=t n /t rs ，式中t n ：待测峰绝对保留时间，t rs ：参考峰的绝对保留时间，且参考峰选择面积较大、保留时间居中的峰。本试验选择（14.41plusmn;0.15）min保留时间的二甲花翠素单葡萄糖苷标品作为参考峰，根据文献 [12-16] 确定葡萄酒样品中花色苷的名称及出峰顺序，结果如图3（以赤霞珠为图例）和表6所示。运用本试验最终确定的HPLC分析方法对供试样品花色苷进行分析测定后，通过相对保留时间及相关文献鉴定出葡萄酒中含量最大的9种花色苷，结果如表6所示。2.2.4 葡萄酒样花色苷的含量分析对5种不同葡萄酒花色苷的检测结果进行计算，得到供试酒样的花色苷含量（以二甲花翠素单葡萄糖苷计），结果如表7所示。从表7可以看出，供试的5个不同酒样中黑比诺葡萄酒的9种花色苷总量均低于其他酒样，为213.61 mg/L，而蛇龙珠葡萄酒总含量最高为413.59 mg/L；9种花色苷中Mv-3-Glu是所有酒样含量最大的花色苷，在147.09～243.14mg/L之间，可占花色苷总量的56.89%左右，不同葡萄酒中Mv-3-Glu的含量由小到大依次为：黑比诺＜美乐＜西拉＜赤霞珠＜蛇龙珠；Mv-3-Acglu在葡萄酒中的含量排第二，在25.05～69.76 mg/L之间；Cy-3-Glu和Pn-3-Couglu在所有葡萄酒中的含量最少，除西拉葡萄酒的Pn-3-Couglu含量超过了10 mg/L外，其他葡萄酒Cy-3-Glu和Pn-3-Couglu含量均没有超过10 mg/L，但是，在黑比诺葡萄酒中未检测到花青素单葡萄糖苷（Cy-3-Glu）。3 结论与讨论通过色谱柱、流动相和洗脱程序的筛选，得出HPLC分析的最佳试验条件，并在该条件下对宁夏贺兰山东麓产区5种不同品种葡萄酒中的酚类物质进行了测定，得出不同品种葡萄酒中单体酚总含量最高的是美乐（794.99mg/L），最少的是黑比诺（355.27 mg/L）；花色苷总含量最高的是蛇龙珠（413.59 mg/L），最少的是也黑比诺（213.61 mg/L），且在黑比诺葡萄酒中花青素单葡萄糖苷并未被检测到，利用这一特征可以区别黑比诺与其他葡萄酒。此结果说明，同一产区不同品种葡萄酒的酚类物质含量不同，且每种酚类物质含量也大不相同，都存在较大的差异，说明酚类物质含量与葡萄的品种特点、产区环境条件、栽培管理方式、酿造工艺等因素有关；Jennifer [12] 曾指出，赤霞珠葡萄酒中Mv-3-Acglu和Mv-3-Couglu比率大于3，以此可以判断赤霞珠葡萄品种的典型特征，在本试验中这一特征也得到了验证，即赤霞珠酒样中的这两种花色苷比率大于3。本试验只研究了产区内部分品种及种类葡萄酒的酚类物质，拟在今后的试验中，对多种葡萄酒的多种酚类物质作更多的测定研究，以期全面了解分析宁夏贺兰山东麓产区葡萄酒酚类物质的构成特点和含量差异，为后期研究提供更多的理论参考。