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xx中医药大学2015届生物制药专业本科生毕业论文（设计） Xx中医药大学中药学院 届本科毕业设计（论文） 题 目：何首乌、虎杖中大黄素-8-O-β-D- 葡萄糖苷的分离纯化 专业 ： 学号 ： 姓名 ： 指导教师 ： 2015年5月 目 录 TOC \t 标题, 1摘 要 1 ABSTACT 2 第一部分 文献综述 3 1 化学成分研究 3 1.1 何首乌 3 1.2 虎杖 4 2 药理作用 5 2.1 何首乌的药理作用 5 2.1.1 抗衰老作用 5 2.1.2 对心脑血管的作用 6 2.2虎杖的药理作用 8 2.2.1对心血管系统的影响 8 2.2.1.9.4对基因表达的影响 10 2.3大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的研究进展 11 3 展望 11 第二部分 何首乌、虎杖中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的分离纯化研究 11 第一章 前言 12 第二章 正文 12 1 实验材料 13 1.1 药品 13 1.2试剂 13 1.3 实验仪器 13 1.4 HPLC流动相配制 14 2 实验方法及步骤 14 2.1 何首乌和虎杖的提取方法 14 2.2何首乌和虎杖中EG的分离纯化方法 14 2.2.6 EG纯度检测 17 3 分离纯化流程图 17 3.1 何首乌的分离纯化流程 18 3.2虎杖的分离纯化流程 18 4 实验结果 19 4.1.1何首乌EG分离纯化 20 4.1.2虎杖EG分离纯化 23 4.2.1何首乌EG纯度检测 24 4.2.2虎杖EG纯度检测 25 5 结论 25 6讨论 25 致 谢 33 Xx中医药大学2015届生物制药专业本科生毕业论文（设计） PAGE 5 摘 要 何首乌是蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根，虎杖是蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc的干燥根茎及根。二者在已有报导其二者中含有的大黄素蒽醌类化合物具有抗肿瘤、消炎和抑菌等活性，而这两种传统中药中含有的大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷相对于临床常用的抗肿瘤药环磷酰胺（CTX）及顺铂（DDP）等更具有更小的肝毒性和肾毒性，具有很好的临床应用前景。 本文通过大孔树脂柱、聚酰胺、硅胶等柱分离方法，从何首乌及虎杖中分离纯化大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，并通过HPLC对其进行含量测定，从而探索大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的制备工艺。 结果：1.何首乌依次经过大孔树脂、聚酰胺、两次的硅胶柱层析可以分离纯化出纯度较高的EG，成本低，易推广。 2.虎杖依次经过乙酸乙酯萃取、聚酰胺柱层析可以分离出含EG含量较高的粗组分，且在HPLC检测中与杂质峰分离较好，后续可用硅胶柱层析继续分离，其分离纯化是可行的。 关键词：何首乌、虎杖、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、分离纯化 ABSTACT Key words: Polygonum multiflorum ；Polygonum cuspidatum；emodin-8-O-β-D-glucoside；separation and purification 第一部分 文献综述 1 化学成分研究 何首乌 中药何首乌为蓼科植物 Polygonum muhiflorum Thunb．的干燥块根，我国大部分地区有出产。何首乌味苦、甘、涩，性微温，归肝、肾经，制用可补精益血，生用则有解毒、截疟、润肠通便之功。[1] 何首乌的化学成分研究最早见于1975 年 ，Hata 等报道[2]从中国首乌中分离得到了新的二苯乙烯类化合物 2，3，4’，5-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。之后，Nonaka 等[3] 1982 年报道从中国首乌中分离得到了原花青素类和蒽醌类成分。随着化学成分研究的深入，何首乌所含化学成分被相继发现。目前，已发现的何首乌中主要活性成为蒽醌类、二苯乙烯苷类、黄酮类、磷脂类等，具体如下： 蒽醌类 何首乌中含蒽醌衍生物约 1.1%。 大黄素、大黄素甲醚、大黄素-1，6-二甲醚、大黄素-8-甲醚、ω-羟基大黄素、ω-羟基大黄素-8-甲醚、2-乙酰基大黄素、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷[4]、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素[5]、大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 [6]、大黄素乙醚 [7]、洋地黄蒽醌[8]。 二苯乙烯苷类 何首乌中含有大量的 2，3，5，4′-四羟基反式二苯乙烯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。 2，3，5，4′-四羟基反式二苯乙烯-2，3-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（何首乌丙素）[9]、2，4，6，4′-四羟基反式二苯乙烯-2-O-β