长期施肥对土壤过氧化氢酶活性的影响.pdfVIP

毕业论文范文模板 长期施肥对土壤过氧化氢酶活性的影响 中美环科 裴锦 1. 分析意义 土壤酶来自微生物，植物和动物的活体或残体，通过催化土壤中的生化反应发挥重要 作用。土壤酶活性是土壤生物活性和土壤肥力的重要指标。不同施肥处理条件下土壤酶活 性存在明显的差异，过氧化氢酶是参与土壤中物质和能量转化的一种重要氧化还原酶，土 壤中的过氧化氢酶促进过氧化氢分解有利于防治它对生物体的毒害作用。在一定程度上可 以表征土壤生物氧化还原的过程的强弱。长期施肥降低了土壤中过氧化氢酶的活性。 2. 测定方法 2.1 容量法 硫酸存在作用下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活性。此法根据过氧化氢与土 壤相互作用时，未分解的过氧化氢用容量法 2KMnO4+5H2O2+3H2SO4—2MnSO4+K2SO4+8H2O+5O2 2.11 试剂配置 a.0.3%过氧化氢溶液 b.3N 硫酸 c.0.1N 高锰酸钾溶液 2.12 实验仪器 100ml 三角瓶 量筒 移液管 吸量筒 2.13 实验步骤 取2g 风干土，放置于100ml 三角瓶中，并注入40ml 蒸馏水和5ml0.3%的过氧化氢溶 液.将三角瓶放在震荡机上震荡20min.然后加入5ml3N 硫酸，以稳定未分解的过氧化氢酶. 再将瓶中悬液用慢速滤纸过滤.然后吸取25ml 滤液，用0.1N 高锰酸钾滴定至淡粉红色终点 2.2 紫色分光光度计法 2.21 所用试剂和仪器 a.0.3% 的H2O2：取30%的H2O2 试剂稀释100 倍即可，溶液标准浓度用高锰酸钾标定 b.1.5mol.L-4 硫酸：取42ml 浓硫酸，稀释后定容至500ml c.饱和铝钾矾 d.0.01 1/5mol.L-4 高锰酸钾：称取3.16g 高锰酸钾溶解后定容至1L 其标准浓度用标准草酸 钠滴定 e.紫色分光光度计 f.震荡器 2.22 测定原理 过氧化氢酶能促进过氧化氢分解成水和氧气.通过加入定量过量的过氧化氢酶，与土壤 作用一定时间后，加入量与剩余量之差即为被过氧化氢酶催化反应消耗的过氧化氢，以此 表示酶活性，过氧化氢在240nm 处有强烈吸收，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下的 吸光度，从而计算酶活性. 毕业论文范文模板 2.23 测定步骤 称取土壤2.00 克于三角瓶，加入40ML 蒸馏水，加入5ML0.3%的H202 溶液，在震荡 机上震荡20 分钟。取下后迅速加入饱和铝钾矾1ML，立即过滤于盛有5ML 1.5mol L-1 的硫 酸溶液的三角瓶中。滤干后，将滤液直接在240nm 处用1 cm 石英比色皿测定吸光度As 。 同时做无土AO 和无基质AK 对照。 补： 方法一试剂和仪器 a.0.3%过氧化氢溶液 b.3N 硫酸 c.0.1N 高锰酸钾溶液 2.12 实验仪器 100ml 三角瓶 量筒 移液管 吸量筒 方法二试剂和仪器 a.0.3% 的H2O2：取30%的H2O2 试剂稀释100 倍即可，溶液标准浓度用高锰酸钾标定 b.1.5mol.L-4 硫酸：取42ml 浓硫酸，稀释后定容至500ml c.饱和铝钾矾 d.0.01 1/5mol.L-4 高锰酸钾：称取3.16g 高锰酸钾溶解后定容至1L 其标准浓度用标准草酸 钠滴定 e.紫色分光光度计