菊花的组织培养49页.ppt

2 、配制培养基 分装到锥形瓶中，每瓶分装 50ml 或 100ml ① 配制培养液 ② 调 PH ③ 培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易， 因此不必添加植物激素 3 、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起 进行高压蒸汽灭菌 1 、选材： 菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2 、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻 轻刷洗，刷洗后在 流水 下冲洗 20min 左右 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入 体积 分数为 70 ％的酒精 中摇动 2 － 3 次，持续 6 － 7s ，立 即将外植体取出，在 无菌水 中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放 入 质量分数为 0.1 ％的氯化汞溶液 中 1 － 2min ，取 出后在 无菌水 中至少清洗 3 次，漂净消毒液 （三）接种 污染的主要来源是空气中的 细菌和孢子 ，接种室消毒 是至关重要的。用 70 ％的酒精 喷雾使空气消毒， 酒 精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射 20 分钟。 1 、接种室消毒 2 、无菌操作要求 操作要在 酒精灯火焰旁 完成，每次使用器械后，都需 要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3 、材料的切取和接种 将消过毒的菊花茎段在 无菌培养皿 中切成 0.5 ～ 1cm 的小段，用 镊子 夹取菊花茎段接种。 4 、接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为 70 ％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧 一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根 据锥形瓶的大小确定，一般 胡萝卜 3 － 4 块，菊的茎 或叶 6 － 8 块 ，也不要太少，以充分利用培养基中的 营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向， 形态学上端朝上，形态学下端 朝下， 不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸 收水分和养分 正常苗 污染苗 1 、外植体带菌 2 、培养基及接种 器具灭菌不彻底 3 、接种操作时带入 4 、环境不清洁 污染途径 课题一 菊花的组织培养 有丝分裂 受精卵 细 胞 分 化 在个体发育中，由一个 或一种细胞增殖产生的后代，在 形态、结构和生理功能上发生稳 定性差异的过程。 1 、细胞分化的概念 一、知识回顾 黑色素细胞在体外培养 30 多代后仍能合 成黑色素；离体培养的上皮细胞，始终保持 为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。 2 、稳定性 3 、不可逆性 细胞分化发生在整个生命进程中。 1 、持久性 2 、细胞分化的特点 造血干细胞 原红细胞 早幼红细 胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成 熟红细胞 死亡 4 、普遍性 细胞分化是 否意味着细胞 中遗传物质的 改变？ 遗传物质 没有改变 ， 不同组织的细胞共同 来源于受精卵，经有 丝分裂产生。 3 、细胞分化的实质 A B D C E E D C A B E D C A B E D C A B E D C A B 基因 在个体发育过程中，不同细胞中 遗传信息的执行情况不同即基因 的选择性表达的过程 红细胞 合成血红蛋白 ( 不合成肌动蛋白 ) 肌细胞 肌动蛋白基因开启 合成肌动蛋白 ( 不合成血红蛋白 ) 肌动蛋白基因关闭 血红蛋白基因关闭 血红蛋白基因开启 4 、细胞分化的结果 细胞产生了不同种类的蛋白质 即出现了不同的结构和功能 愈伤组织 胚状体 1958 ，美国，斯图 尔德 植物组织培养 离 体 二、基础知识 （一）植物组织培养概念 关键词： 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 在 无菌 和 人工控制 条件下，将离体的 植物 器官、组织、细胞 ，培养在人工配置 的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导 其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽， 最终形成 完整的植株 。 又称： 植物离体培养 脱分化（或去分化） ：由高度分化的植物组 织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化 ：脱分化产生的愈伤组织继续进行培 养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 外植体 ：用于离体培养的植物器官或组织片段。 愈伤组织 ：细胞排列疏松、无规则、高度液