分析方法的开发.docxVIP

分析方法的开发 分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、 流动相的选择、 检测波长的选择和梯度的优化几个方面。 目前高效液相多做反相使用，所以本文主要以反相为例进行讲解。 色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻， 要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板 数，能提供更好的分离度，从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性，所以 5um 填料的色 谱柱长要 250mm ， 3.5um 填料的柱长要 150mm ，基本上都是各个粒径柱长最长的。喜欢近两 年新出的亚二微米填料的色谱柱， 50mm 柱长就能提供很高的理论塔板数， 而且柱长和粒径小了， 流速增加很多， 能节省很多的分析时间， 极大的提高工作效率。 一般选用直径为 4.6mm 或 3.0mm 的柱子， 太细了可能会增大柱外效应。 填料的孔径对于小分子合成药物不需要考虑， 普通的分析 柱都在 100A 左右，能满足分析检测的需要。对于 API 分析方法开发，一般要求必须做色谱柱的 筛选实验，最少使用三种不同类型的色谱柱，每种类型三只，要来自于不同厂家。 三种类型包括： 1) 普通的 C18 或相应的 C8 色谱柱，如 Waters 的 Symmetry C18 或 C8， YMC 的 Pack Pro C18 或 C8， Agilent 的RXC8 等，其它公司如菲罗门和热电也有相应的色谱