实验四DNA片段回收.pptVIP

鲁东大学生命科学学 hool of life Sciences 实验四DNA片段的回收  鲁东大学生命科学学 hool of life Sciences 实验目的 掌握吸附膜回收琼脂糖凝胶中DNA片段的方法 、实验原理 首先利用低熔点琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段,然后紫外光下切割 含目的DNA条带的胶块,再利用胶回收试剂盒回收纯化DNA片段。 在离心吸附柱内使用一种特殊的硅基质滤膜,这种滤膜在低PH值、高 浓度盐(盐酸胍,NaI,NaC104等)存在的条件下,可以选择性吸附DNA片 段,而蛋白质和其它杂质不会被吸附。再通过一系列漂洗、离心等步骤 将残留的引物、核苷酸、蛋白质等杂质去除。最后用低盐、高PH值的洗 脱缓冲液或水从滤膜上将纯净的DNA洗脱下来。回收DNA大小100bp-50kb  鲁东大学生命科学学 hool of life Sciences 三、器材与试剂 1.实验仪器 琼脂糖凝胶电泳系统 紫外观察分析仪 离心机 单面刀片 恒温水浴锅 2.试剂 胶回收试剂盒  鲁东大学生命科学学 hool of life Sciences 目的DNA胶块 四、实验步骤 Spin Column移至1.5 m Tube 解胶块 溶液移至 Spin Column }清洗 Spin Column  鲁东大学生命科学学 hool of