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白细胞计数--Neubauer(牛鲍)板计数法 * * 1、目的:掌握显微镜法白细胞计数的原理 及方法。 2、原理:用白细胞稀释液将血液稀释一定 倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血 液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 * 3、器材:显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。 4、试剂:白细胞稀释液:2%冰乙酸2ml, 10g/L结晶紫(或亚甲蓝)3滴,加蒸馏水到100ml。 5、标本:新鲜 全血或末梢血。 * 改良的牛鲍 计数板。 * * 操作步骤 1、加稀释液:用吸管吸取白细胞稀释液 0.38ml于小试管中。 2、吸取血液:用微量吸管吸取新鲜全血或 末梢血20ul,擦去管尖外部 余血。将吸管插入试管中白 细胞稀释液的底部,轻轻放 出血液,并吸取上层白细胞 稀释液清洗吸管2-3次。 * 3、混匀:将试管中血液与稀释液混匀,待 细胞悬液完全变为棕褐色。 4、充池:再次将小试管中的细胞悬液混 匀,用微量吸管吸取7ul左右充 入改良牛鲍计数板的计数池中, 室温静置2-3分钟,待白细胞完 全下沉。 * 5、计数:在低倍镜下计数四角4 个大方格的白细胞总数。 6、计算: WBC=N/4×10×20×106=N/20×109 其中N为4个大方格的白细胞总数。 * 7、细胞计数原则 大方格四边压线细胞数左不数右,数上不数下, 弓形移动 * 8、考核评价 a. 常规考核标准 (RCS) RCS= ×100% 评价: 白细胞≤ 4.0×109/L者, RCS<30% 白细胞在(4.1-14.9)×109/L者 RCS<20% 白细胞≥15.0 ×109/L者 RCS<15% 超过上述标准者为不合格 b. 其他方法 四大格所见白细胞最大值—最小值 四大格所见白细胞数平均值 *
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