实验四农杆菌转化烟草与拟南芥.pptVIP

实验四、农杄菌转化烟草和拟南芥 Nicotiana tabacum Arabidopsis thaliana 會卧%  选择标记基因与报告基因 必备条件 ◆编码一种不存在于正常植物细胞中的酶 ◆基因较小 ◆能在转化体中得到充分表达 ◆检测容易,并且能定量分析 选择标记基因与筛选标记基因 M新零素碲酸持移酶基因(卡那,新霉素,G418),am(钝霉素,壮观霉 素),spe(壮观霉素),srl(链霉素),caut(氯霉素),bur(草苷膦) 报告基因: report gene(筛选标记之 在转化系统中通过瞬时及稳定表达检测来确定转化的DNA顺序(基因)是否能 在转化细胞中得到表达,起到报告的作用 gus基因(阝-葡萄糖苷酸酶基因)」g(绿色荧光蛋白基因) 转化目的基因可以省略附加的报告基因,但选择标记基因是不可缺少的  植物基因转化受体 高效稳定的再生能力 ◆较高的遗传稳定性 ◆具有稳定的外植体来源 ◆对选择性抗生素敏感 植物基因转化受体系统类型 愈伤组织再生系统 直接分化再生系统 ◆原生质体再生系統 ◆胚状体再生系统 ◆生殖细胞受体系统  植物遗传转化方法 双子叶植物 基因枪法 无宿主限制, 技术限制 植物遗传转化 PEG诱导原生质 原生质体培 电穿孔法 操作简单,易造 成原生质体损伤  转基因方法