微生物的遗传变异和育种 课件.pptVIP

影印试验 (replica plating) ? 1 、物理诱变： ? 紫外线、 X 射线等 ? 紫外线诱变机制 ? 辐射剂量 ? 光复活作用 二、诱变与育种 ? 2 、化学诱变： ? 诱变剂： 亚硝酸、硫酸二乙酯、亚硝基胍等 ? 诱变机制 ? 注意事项： 选择适宜的诱变剂及剂量，适当的温度 和 PH ，终止反应，安全 基因突变及其机制 ( 一 ) 自发突变与育种 1 、从生产实践中选育 选育步骤 (1) 采样 (2) 加富培养 (3) 平板分离 (4) 性能测定 三、突变与育种 定向培育一般是指用某一特定环境长期处理某一 微生物培养物 ( 群体 ) ，同时不断对它们进行移种传 代，以达到积累和选择合适的自发突变体的一种 古老的育种方法。由于自发突变的频率较低，变 异程度较轻微，所以培育新种的过程一般十分缓 慢。与诱变育种、杂交育种和基因工程技术相比， 定向培育法带有守株待兔的被动状态。 例如，异烟肼是吡哆醇的代谢拮抗物 ( 即结构类 似物 ) ，两者分子结构类似。 2 、定向培育优良菌种 ( 二 ) 诱变育种 诱变育种就是利用物理或化学诱变剂处理均匀分 散的微生物细胞群，促进其突变频率大幅度提高， 然后设法采用简便、快速和高效的筛选方法，从中 挑选少数符合育种目的突变株，以供生产实践或科 学实验之用。 诱变育种除提高产量外，还可改进产品质量、 扩大品种和简化工艺等目的。它具有方法简便、工 作速度快和收效显著等优点，仍是目前最广泛使用 的育种手段。 1 、诱变育种的基本环节 ? 1 、初筛：以 量 为主 ? 2 、复筛：以 质 为主 2 、诱变育种的步骤 3 、营养缺陷型的筛选 ? 营养缺陷型 (auxotroph) 是指通过诱变而产生 的，在一些营养物质 ( 如氨基酸、维生至少和碱 基等 ) 的合成能力上出现缺陷，因此必须在基本 培养基 (minimal medium) 中加入相应的有机 营养成分才能正常生长的变异菌株。 ? 野生型 是指从自然界分离到的任何微生物在其 发生人为营养缺陷突变前的原始菌株。在其相 应的基本培养基上生长。 ? 基本培养基 ? 完全培养基 ? 补充培养基 与筛选营养缺陷型突变株有关的 3 类培养基： 筛选营养缺陷型菌株 4 个环节： ? (1) 诱变剂处理 ? (2) 淘汰野生型 ? (3) 检出缺陷型 ? (4) 鉴定缺陷型 4 、诱变育种工作中的几个原则 (1) 选择简便有效的诱变剂 目前在实践上常用的诱变剂主要有紫外线 (u.v.) 、氮芥、硫酸二乙酯、 N- 甲基 - N′ - 硝 基 -N- 亚硝基胍 (NTG 或 MNNG) 和亚硝基甲 脲 (NMU) 等。后两种因为有突出的诱变效果， 所以被誉为“超诱变剂”。 (2) 挑选优良的出发菌株 (4) 选用最适剂量 要确定一个合适的剂量，常常要经过多次试验。就 一般微生物而言，诱变率往往随剂量的增高而提高， 但达到一定剂量后，再提高剂量反而会使诱率下降。 根据对紫外线、 X 射线和乙烯亚胺等诱变效应的研 究结果，发现正变转多地出现在偏低的剂量中，而 负变较多地出现于偏高的剂量中；还发现经多次诱 变而提高产量的菌株中，更容易出现负变。因此， 在诱变育种工作中，目前比较倾向于采用较低的剂 量。 (5) 利用复合处理的协同效应 诱变剂的复合处理常常呈现一定的协同效应， 这对育种实践是很有参考价值的。 (6) 利用和创造形态、生理与产量间的相 关指标 为了确切地了解某一突变株产量性状的提高 程度，必须进行大量的分析测定和统计工作。 (7) 设计和采用高效筛选方案和方法 通过诱变处理，在微生物群体中会出现种种突变 型个体，绝大多数是负变体，要在其中把极个别 的产量提高较显著的正变体筛选到手，就要求采 用效率较高的科学筛选方案和方法。 筛选过程以分初筛与复筛两阶段进行为好。前者 以量 ( 选留菌株的数量 ) 为主，后者以质 ( 测定数据 的精确度 ) 为主。 第四节 基因重组 凡把两个不同性状个体内的遗传基因转 移到一起，经过遗传分子的重新组合后，形 成新遗传型个体的方