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- 2020-07-07 发布于河北
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Image J 测脊髓损伤的体积
组织:脊髓
长度:10mm
切片厚度:100um
准备工作:
1 损伤后30min,断头处死,共处死6只大鼠用于实验。然后取出损伤区域的脊柱,10mm,置于4%多聚甲醛中过夜。
2 待固定完全后,取出脊髓,放入30%蔗糖缓冲液中进行脱水。
3 待脱水完全后,用滤纸吸干组织表面液体,置于冰冻切片机内,速冻,备用。
4 用冰冻切片机行连续切片,由损伤前端开始切,切片厚度为100um,依次黏贴在载玻片上,每张载玻片贴4片,顺序为从左到右依次排列。并做好起始标记。同时载玻片亦按顺序放置在玻片盒中,备用。
5 待所有切片切完后,用olympus显微镜拍照,选取40×的照片,并依次编号,备用。
6 镜台测微尺图像拍摄:将镜台测微尺置于载物台上,然后用olympus显微镜,在同一焦距下,分别用4倍,10倍,40倍物镜拍摄,并分别进行编号,备用。
ImageJ软件测量损伤体积(LV)的操作方法:
1 安装ImageJ软件(已经安装该软件的直接进入第二步)
ImageJ软件下载,(版本1.42)直接双击下载后的程序即可安装,软件运行最少需要64M内存,可以在Windows、Linux、Mac OS等操作系统上运行。
2 损伤体积(LV)测量的具体流程
2.1获取图片
将olympus显微镜中拍摄的组织照片和测微尺的照片拷贝到个人电脑,建立文件夹
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