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华师细胞生物学简答题 (个人复习总结 ) 1、何谓成熟促进因子（ MPF ） ?包括哪些主要成分？如何证明某一细胞提取液含有 MPF？ 成熟促进因子是指 M 期细胞中存在的促进细胞分裂的因子，是由两个不同亚基组成的异质 二聚体，其一为调节亚基，有周期蛋白组成；其二为催化亚基，是丝氨酸 / 苏氨酸型蛋白激酶，其活性有懒于周期蛋白， 故称为周期依赖性蛋白激酶。 可以通过蛙卵细胞质移植实验证实 MPF 。成熟蛙卵细胞的细胞质可以诱导未成熟的蛙卵细胞提前进入成熟期。 2、简述微管、微丝和中间纤维的主要异同点？（顺序为微管、微丝、中间纤维） 直径： 22nm、 7nm、 10nm；基本构件： α 、 β —微管蛋白，肌动蛋白，中间纤维丝蛋白； 相对分子量（乘 10 的 3 次）：50，43，40~200；结构： 13 根原丝围成的 α —螺旋中空管状，双股 α —螺旋，多级螺旋；极性：有，有，无；单体蛋白库：有，有，无；踏车现象：有， 有，无；特异性药物：秋水仙素、长春花碱，细胞松弛素 B、鬼笔环肽，无；运动相关蛋白： 驱动蛋白、动力蛋白，肌球蛋白，无；主要功能：细胞运动、胞内运输、支持作用，变形运动、形状维持、胞质环流、胞质分裂环的桶状结构，骨架作用、细胞连接、信息传递；细胞分裂：纺锤体，无，包围纺锤体。 3、为什么将内质网比喻“开放的监狱”？ KDEL 信号序列为内质网驻守信号， 如果内质网驻守蛋白被错误的包装进了 COPII ，并运输 到顺面高尔基体，高尔基体膜上存在 KDEL 识别受体，能识别错误运输来的内质网驻守蛋 白，并形成 COP I 小泡，将内质网驻守蛋白运输返回内质网。 4、在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因 A ，如果想由此获得该基因 的单克隆抗体，请简要叙述实验方案及其实验原理。 英国科学家 Milstein 和 Kohler 因提出单克隆抗体而获得 1984 年诺贝尔生理学或医学奖。它是将产生抗体的单个 B 淋巴细胞同肿瘤细胞杂交，获得既能产生抗体又能无线增值的杂种 细胞，并一次生产抗体的技术。其原理是： B 淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无 限分裂； 而肿瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代， 但不能产生抗体。 将这两种细胞融合后 得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。 实验方案： a、表达基因 A 的蛋白，免疫小老鼠，获得免疫的淋巴细胞； b、将经过免疫的 小老鼠的淋巴细胞与 Hela 细胞融合； c、利用选择培养基对融合细胞进行培养筛选，只有真正融合的细胞才能继续生长； d、融合细胞的培养，抗体的纯化。 5、微管是体内膜泡运输的导轨，请分析体内膜泡定向运输的机制？ 微管是有极性的，微管的马达蛋白（动力蛋白和驱动蛋白）运输小泡也是单向的 。动力蛋 白向微管的负极运输小泡，驱动蛋白向微管的正极运输小泡。 ，另外，起始膜泡上有 V-SNARE ，靶膜上有 T-SNARE 。V-SNARE 与 T-SNARE 选择性识别并定向融合。这两种因素共同导致了膜泡的定向运输。 6、简述细胞周期蛋白 B 的结构特点和动态调控机制？ 1 / 7 华师细胞生物学简答题 (个人复习总结 ) 周期蛋白 B 含有一个保守的周期蛋白框，选择性与相应的 CDK 结合。在 N 端含有破坏框， 通过其破坏框结构结合泛素进行降解，达到动态调控的目的。周期蛋白 B 在 M 期达到最高 峰。 周期蛋白 B 的降解是通过泛素化途径来实现的。一种被称为泛素的多肽在需要能量的蛋白 质降解过程中扮演着重要的角色。这种多肽由 76 个氨基酸组成，打上标志的蛋白质就会被 运送到细胞内的“垃圾处理厂” ，在那里被降解。原来细胞中存在着 E1 、 E2 和 E3 三种酶， 它们各有分工。 E1 负责激活泛素分子。泛素分子被激活后被运送到 E2 上， E2 负责把泛素 分子绑在需要降解的蛋白质上。但 E2 并不认识指定的蛋白质，这就需要 E3 帮助。 E3 具有 辨认指定蛋白质的功能。当 E2 携带者泛素分子在 E3 的指引下接近指定蛋白时， E2 就把泛 素分子绑在指定蛋白质上。这一过程不断重复，指定蛋白质就被绑上了一批泛素分子。 7、简述癌基因与抑癌基因的关系以及癌细胞的特点。 a、癌基因与抑癌基因的关系：癌基因是控制细胞生长分裂的正常基因的突变形式，能够引 起正常细胞癌变。 抑癌基因是正常细胞增值过程的负调控因子， 编码的蛋白往往在细胞周期 的检验点上发挥阻止细胞周期进程的作用。 如果抑癌基因突变， 丧失正常细胞增值过程中的负调控因子的作用，导致细胞增值失去控制，诱导癌症的发生。 b、癌细胞的特点：细胞生长和分裂失去控制；具有浸润性和扩散性；细胞相互作用改变；蛋白表达谱系改变； mRNA 转录谱系改变。 8、简述