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细胞凋亡的生物学特征 【摘要】细胞凋亡是细胞的主动死亡过程， 此过程涉及一系列基因的激活表达和调控。凋亡是为了适应生存环境的主动死亡过程， 并不是病理条件下的损伤。 核酸内切酶反应是凋亡分子 (APO)的重要步骤。目前，人们对细胞凋亡的发生机制及其与疾病的关系有了比较全面清晰的认识 ,这对重新认识疾病的发生机制具有 划时代的意义。而认识细胞凋亡的生物学特征有助于我们更好的了解细胞凋亡 , 故本文主要就细胞凋亡的生物学特征进行综述。 【关键词】细胞凋亡；生物学特征；形态学特征；生化特征细胞凋亡的特征 1.形态学特征 1.1.电镜下观察特征 凋亡细胞在电镜下表现为：细胞核缩小，电子密度增高，核膜皱缩，染色体密集于核膜下，分布不均匀。后来，核被分解成碎片，核碎片在细胞质中与细胞器等成分一起被细胞膜包裹。 从外观上看，细胞表面产生了许多泡状或牙泡状突起。以后逐渐分离，形成了单个的凋亡小体。此后，细胞质密度增高，细胞骨架可被破坏，但细胞器的结构可以保持到细胞凋亡后期。 内质网在细胞凋亡后期扩张成泡状，与细胞膜融合成胞质气泡。这时，凋亡小体逐渐脱离细胞体，进入间 质。于是凋亡细胞被逐步解体。 从细胞凋亡开始到凋亡小体的出现才数分钟， 而整个细胞凋亡的过程可以持续数小时。 1.2 细胞凋亡的三个阶段 按细胞凋亡的形态学特征变化，细胞凋亡可分为如下三个阶段：⑴凋亡开始时，细胞表面的特化结构 (如微绒毛、细胞突起及细胞表面的褶皱等 ) 消失，但细胞膜依然完整，没有失去选择通透性；线粒体大体保持完整，但是偶 尔也见到线粒体变大， 嵴增多；内质网囊腔膨胀扩大； 细胞骨架的结构有时变得致密和紊乱；染色质浓缩从而呈致密碱性染色 , 并分布在核膜周围或一侧，呈眼球状。细胞凋亡会使细胞质、 细胞核和细胞膜发生一系列生物化学和物理上的变化 ②。在细胞凋亡早期， 细胞膨胀变圆， 与邻近细胞的联系断绝并且脱离后皱缩。在细胞质中，内质网肿胀积液形成液泡 ,此时胞质细胞器压缩，但线粒体的形态仍保持正常。在细胞核内，染色质逐渐凝集成新月状，附在核膜周边，嗜碱性增强。最终细胞核裂解为由核膜包裹的碎片。在细胞膜上，细胞结点不再相连，细胞膜变得更活跃进而发生内陷。 这些变化都将导致细胞裂解为由细胞膜包裹细胞内容物的凋亡小体。 在生理条件下细胞膜上发生特定的调节作用， 这可以使吞噬细胞识别并吞噬凋亡小体。 在细胞发生凋亡的过程中不会伴有细胞内容物渗漏和 炎症反应。⑵形成凋亡小体。⑶凋亡小体形成后，被巨噬细胞吞噬消化，此过程不影响其他细胞的生理功能，也不引起周围细胞的炎症反应。 2.生化特征 2.1 胞浆 Ca2+和 H+ 水平升高 与细 胞凋 亡相 关 的酶 ，最 主要 的就是凋 亡性核酸 内切酶（ apoptotic endonuclease），而该酶又分为 DNaseⅠ型酶和 DNaseⅡ型酶。DNaseⅠ型酶为 Ca2+ （主要）、Mg 2+依赖性核酸内切酶，该种酶能够被 Ca2+ 和 Mg 2+ 所激活，并且随 着其浓度的增加活性增加。所以要想该酶更好地发挥作用，就必须升高 Ca2+ 的 水平； DNaseⅡ型酶为 pH 依赖性核酸内切酶，同理，要想该酶更好地发挥作用， 也必须得升高的 H+的水平。 早在 20 世纪 70 年代就有人发现在正常细胞中存在由  Ca2+和  Mg2+依赖性内 源性核酸内切酶，这种 Ca2+、Mg 2+依赖性核酸内切酶是一种双链 DNA 内切酶，将这类与凋亡有关的核酸内切酶 DNase，统称为凋亡性核酸内切酶。 经这种酶切割后所产生的 DNA 最小单位长度为 180bp，其余 DNA 片段长度为 180bp 的倍数（寡聚体），经此酶的消化， 可产生类似凋亡细胞的 DNA 降解现象， Ca2+和 Mg 2+ 能激活此酶的活性， Zn2+显著抑制其作用。 DNA 的切割动力学分析表明，这种 DNA 降解片段可以在 1~2h 内检测到， DNA 降解过程从细胞死亡前 5h 开始，到 24h 绝大多数凋亡细胞降解达到高峰。 目前已有更多的实验证明， 胞内酸性 pH 或 H+浓度的增加可促发凋亡的形 成，其机制可能与相关蛋白酶类的激活有关。 Park 等在细胞培养中，通过改变 pH 研究白血病 HL-60 细胞凋亡，发现当培养基（细胞外 pH） pHe=6.2~6.4 时细 pHi 为 6.6~6.9 即诱发凋亡；当 pHe=5 时，细胞则表现为坏死形式。这一实验显示了胞内 pHi 可在一定范围内决定细胞的死亡形式。 Gottlieb 等则以细胞表面 Fas 蛋白抗体、放线菌酮及紫外线分别处理细胞，发现当细胞 pHi 降至 6.8 以下 后，才相继出现“梯状 DNA 片断”及凋亡的形态特征，进一步表明了酸性 pHi 参与调控细胞凋亡的发生。