现代科技综述知识文库:梅毒诊断试剂.pdf

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现代科技综述系列—— 梅梅毒毒诊诊断断试试剂剂 科技是人类区别于动物的重要文明之一, 是人类对自然规律研究 利用的学科。 本文提供对科技基本概念 “梅毒诊断试剂” 的解读,以供大家了解。 梅梅毒毒诊诊断断试试剂剂 梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的性病。 病原体通过粘膜(如不洁性交)、破损的皮肤、输血以及 胎传侵入人体,使宿主产生多种类型的血清抗体。 梅毒血清学试验以所用的抗原为基础可分为两类:一 类是螺旋体抗原,用于检测特异性抗体;另一类是非 螺旋体抗原(即心磷脂抗原),用于检测非特异性抗脂质 抗体,也称反应素。 1906年,华氏(Wasserman)首先建立梅毒血清学试验。 由于采用动物组织细胞做抗原,材料来源广泛,制作 简便,随之出现了一系列诊断抗原,有补体结合反应 的抗原(如华氏、Kolmer 氏抗原) 絮状反应的抗原(如 康氏、克氏抗原) 。 但是这些抗原都是粗制品,含有许多杂质,容易出现 假阳性,试验操作也较麻烦。 1942年,M .Pangborn首次提纯抗原的有效成分心磷 脂 卵磷脂。 1946年Harris,A等人用提纯的心磷脂、卵磷脂 胆固 醇3种乙醇溶液按比例配成V RL抗原,它能与病人血 清中具有抗体特性的反应素起玻片絮状反应,1滴抗原 悬液检测1份标本,在显微镜下放大100倍观察结果, 使用方便、快速、具有高度敏感性 特异性,在国外 早已取代粗制品康氏抗原、华氏抗原。 然而V RL抗原需要在临用前配制抗原悬液,0 .5ml 抗原配成抗原悬液后可检测250~300份标本,有效期 只有1d,标本少时造成浪费。 血清标本需要56 ℃灭活30min 。 196 1年J .Portnoy等把V RL抗原改进为USR(Unheated Serum Reagin)试剂,由于在试剂中加入乙稀二胺四醋 酸(E TA),可保护抗原不致迅速变性,使抗原悬液有 效期从1d延长至半年以上,试剂随时可用;又因试剂 中含有氯化胆碱,使血清标本以化学方法灭活而不用 加热灭活,使用更为方便。 1963年,J .Portnoy等又在USR试剂基础上加入炭颗 粒,在纸片上做试验,即RPR纸片法(Rapid Plasma Reagin Card Test) ;它除了具有USR试剂的优点之外, 阳性反应时抗原颗粒与炭颗粒在纸片上起协同凝集反 应,肉眼可见黑色块状凝集,不用借助显微镜即可观 察结果,有效期在1年以上。 随后发展起来的自动反应素试验(ART),把含有炭颗粒 的抗原悬液通过自动分析器作自动分析,使反应后的 溶液吸附于纸片上,可随时观察结果,且能长期保 存;然而操作时强阳性血清可能污染阴性血清,造成 假阳性结果而未被广泛采用。 70年代后,有人在V RL抗原或USR试剂中加入脂溶性 染料,把抗原颗粒染色,使之在纸片上做试验肉眼可 见,例如加入苏丹黑即为反应素筛选试验(Reagin Screen Test ,RST) ;加入甲苯胺红即为甲苯胺红不加热 的血清试验(TRUST) 。 1980年,卫生部武汉生物制品研究所试制成功V RL 抗原,并于1985年改进为USR试剂。 1988年制成RPR纸片法试剂,199 1年卫生部宣布废除 康氏华氏抗原,规定使用USR RPR试剂。 这些非螺旋体抗原试验有较好的特异性,敏感性强, 操作简便,费用低廉,常用于梅毒病的普查、常规诊 断 疗

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