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培养基实罐灭菌时间的计算 0 0 0 0 ln ln ln lg lg 2.303 lg s s s s d N K d N K N N K N N N K e N K N ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 根据对数残留定律，灭菌所需的时间可用下式计算： τ 为灭菌时间， s ； K 为灭菌速率常数， s -1 ，与灭菌温度和 灭菌的菌种类型有关； N 0 为开始灭菌时原有菌个数，个； Ns 为结束灭菌时残留菌的个数，个； 在计算过程中， N 0 和 Ns 如何取值？ 对于 Ns ，如果取 Ns =0 ，那么， t = ∞ ，这显然 是与现实情况不符。 对于如何 Ns 取值？通常取 Ns = 0.001 个 / 罐，这 个数值如何理解？灭菌 1000 次，有一次是失败的， 残留了一个活菌体。这个数值的取值的大小，也间 接反应了该生产过程中的技术管理水平。 由于灭菌速率常数 K 与灭菌温度和灭菌的菌种类有 下列关系： 式中 A 为系数， s -1 ； E 为灭菌时所需活化能， J/mol; 在一般计算中都以培养基中最难杀灭耐热杆菌的芽 孢作为灭菌对象。 A=1.34 × 10 36 ， E= 284219.12 J/mol / E RT K Ae ? ? 14845 lg 36.127 K T ? ? ? K 值 例 1 有一发酵罐内装培养基 40m 3 ，采用实罐灭菌，灭 菌温度 121 ℃ ，问灭菌需要多长？ 解： 一般设灭菌前每毫升培养基含有耐热菌的芽孢为 2 × 10 7 ，不考虑培养基升温阶段的灭菌效应。 N 0 =40 × 10 6 × 2 × 10 7 =8 × 10 14 Ns =0.001 个 lg K =-14845/T+36.172=-14845/(273+121)+36.127=-1.55 K =0.0281(s -1 ) 14 0 2.303 2.303 8 10 lg lg 1442.6( ) 24.0(min) 0.0281 0.001 s N s K N ? ? ? ? ? ? 若考虑培养基加热升温阶段的灭菌效应，由于 K 是温度的 函数，求升温阶段从温度 T 1 到灭菌温度 T 2 的平均灭菌速度 常数 K m ，可以用下式求取： 同时培养基升温至 T 2 时菌的总数由 N 0 减少至 N p 由公式求取 N p ： 2 1 2 1 T T m KdT K T T ? ? ? 0 2.303 lg m p p K p s N N e N K N ? ? ? ? 培养基加热升温阶段有灭菌效应，培养基达到 灭菌保温时间后，由灭菌温度冷却至发酵培养温度 的过程也有灭菌效应，所以在灭菌操作时不要人为 地再延长灭菌时间作为安全系数，这样会导致培养 基营养成分破坏过大，导致发酵单位下降。 培养基实罐灭菌的热量计算 ? 分别计算出发酵车间每个使用蒸汽设备的 蒸汽消耗量，然后把在同一时刻不能错开 的用汽设备叠加起来求得这个车间的最大 用蒸汽负荷量。 ? 在发酵车间，培养基实罐灭菌蒸汽用量最 大，实罐灭菌可以分为升温、保温灭菌和 冷却三个阶段。 培养基实罐灭菌的热量计算 ? 升温阶段 ①间接加热 τ 为间歇加热时间， h ； G 为培养基质量， kg ； c 为培养 基比热容， kJ/(kg· ℃ ) ； K 为平均传热系数， kJ/(m 2 · h· ℃ ) ； t s 为加热蒸汽温度 , ℃； t 1 为培养基开始加 热温度 , ℃； t 2 为培养基加热结束时温度 , ℃； S 为蒸汽消 耗量， kg ； r 为蒸汽汽化热， η 为加热过程的热损失。 1 2 2 1 ln ( ) (1 ) s s t t Gc KA t t Gc t t S r ? ? ? ? ? ? ? ? 例 2 有一 40m 3 发酵罐内装培养基 28m 3 ，不锈钢蛇管传热面 积 30m 2 ，采用实罐灭菌，培养基原始温度 25 ℃ ，用 196kPa （表压）蒸汽通过蛇管间接加热培养基至 90 ℃ 。①求加热 时间和蒸汽用量各多少？ 解：已知 G =28000kg ， F =30m 2 查 196kPa （表压）时 t s =132.9 ℃ ， t 1 =25 ℃ ， t 2 =90 ℃ ， K =1674 kJ/(m 2 · h· ℃ ) ， c =4.18 kJ/(kg· ℃ ) 1 2 2 1 28000 4.18 132