分析化学 第10章 吸光光度法2.pptVIP

第10章 吸光光度法 Absorption Photometry 三、分光光度仪spectrophotometer 1. 仪器基本结构(basic structure) 光源(light source) 要求：发出连续光谱、稳定、 强度较大 可见光区——钨丝灯(360～800 nm) 紫外光区——氘灯(185 ～ 400nm) 常用光源(light sources current used) 单色器(monochromator) 要求：色散和分辨力强 、适用波长范围广 常用单色器——棱镜或光栅 可见光区——玻璃、石英 紫外光区——石英 单色器一般由入射狭缝、准直镜、色散元件、聚焦镜和出射狭缝组成。通过调节单色器或反射镜的角度使所需波长的光通过狭缝照射到吸收池 吸收池(absorption cell) 要求：无色透明、耐腐蚀、厚度相等 常用——玻璃或石英比色皿 厚度——0.5, 1, 2, 3 ,5 cm 可见光区——玻璃、石英 紫外光区——石英 检测器(detector) 要求：灵敏度高、性能稳定、适用范围宽 常用——光电池、光电管和光电倍增管、（二极管阵列、半导体等） 硒光电池——可见光 光电管和光电倍增管——紫外、可见及红外 信号显示系统 （signal-display system） 稳定、快捷、清晰 早期——检流计 、微安表等 （有透射比T 和吸光度A 两种标尺） 目前——数字电压表、函数记录仪、计算机 2. 使用方法(operating procedure) 开电源 选择测定波长 将参比溶液的T和A调至100％和0 测定目标（被测）溶液的A值 参比溶液(reference solution) 作用：消除由于吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差，并扣除干扰的影响 选择原则：有效消除被测溶液中非被测物产生的吸收和其他影响因素 选择方法： 1）当试液及显色剂均无色时，可用蒸馏水作参比溶液 2）显色剂有颜色，可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液 3）显色剂为无色，而被测试液中存在其他有色离子，可用不加显色剂的被测试液作参比溶液 4）改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，可以此溶液作为参比溶液消除干扰 5）显色剂和试液均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其他试剂均按试液测定方法加入 3. 仪器类型(classification/types) A.单光束分光光度仪(single beam spectrophotometer) 仪器结构 特点 仪器结构简单、需参比、不能扫描 B.双波长分光度仪(dual wavelength spectrophotometer) 仪器结构 特点(features) 记录试液对波长为λ1和λ2的光的吸光度差值?A 不需要参比溶液，用参考波长光代替 参比波长的选择(reference wavelength) 1）以等吸收点对应的波长(equiabsorption wavelength)为参比波长 2）以有色配合物吸收曲线下端的某一波长作为参比波长 3）以显色剂的吸收峰为参比波长 2，4，6－三氯苯酚存在下苯酚的测定 D. 多通道分光光度仪(multichannel spectrophotometer) 光路 光源－聚光镜－样品池－光栅－光二极管阵列 特点 入射光为复合光、后分光、全波长同时测定 4.仪器测量误差(measurement error) dT =ΔT=±0.01 则测量A的相对误差（Er）: Er = dA = εbdc 四、显色反应及影响因素colour developing reactions influence factors  1. 显色反应和显色剂 对显色反应的要求 灵敏度高 选择? 较大的显色反应。 选择性好 显色剂只与被测组分反应,避免共存组分干扰。 有色物组成相对固定，如： Fe3+ + 磺基水杨酸 → 三磺基水杨酸铁(黄色) （组成固定） Fe3+ + SCN - → FeSCN2+、 Fe(SCN)2+ …… （组成不固定） 有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大 有色化合物的化学性质应足够稳定 反应条件温和、反应较快 显色反应类型 氧化还原 如：Mn2+ 氧化为紫红色的MnO4- 磷钼黄还原为磷钼蓝 络合 二元络合 如上Fe-ssal、