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专题二微生物的培养与应用 课题二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 尿素 是一种重要的农业氮W 尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成 氨之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脉酶。尿素最初是从人的 尿液中发现的。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 筛选菌株 实验室中微生物的筛选应用的原理 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、 pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 选择性培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作 选择培养基。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 配制选择培养基的依据 根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物 可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可 选择培养金黄色葡萄球菌等。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 统计菌落数目 测定微生物数量的常用方法有 稀释涂布平板法 和显微镜直接计数。 稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置 3?5个平板，该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 选择菌落数在30?300的平板进行计数,并 取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，邑此，统 计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 采用此方法的注意事项：1.一般选取菌落数在 30~300之间的平板进行计数 2.为了防止菌落蔓延，影响计数, 可在培养基中加入 TTC 3.本法仅限于形成菌落的微生物 设置对照该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。对照实验是该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 指除了被测试的条件以外， 其他条件都相同的实验， 其作用是比照试验组， 排除任何其他可能原因的干扰， 证明确实是所测试的条件引起相应的结果。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 实验设计 实验设计包括实验方案，所需仪器、材料、用具和药品，具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 和安排。 土壤取样：同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。在富含有机质的土壤表 该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 M 有更多的微生物生长。从富含有机物、潮湿、 pHe 7的土壤中取样。铲去表层土，在距地表约 3?8cm该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 的土壤层取样。 样品的稀释：样品的稀垣丝将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际操作中，通常选用一定稀该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在 30~300之间、适于计数的平板。 测定土壤中细菌的数量，一般选用 104 105 106 测定放线菌的数量，一般选用 103 104 105 测定真菌的数量，一般选用 102 103 104 微生物的培养与观察 不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌 30~37C 1~2天 放线菌25~28 C 5~7天 霉菌25~28 C 3~4天 每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 导致一楼菌落的数目。一般来说，在一定的培养条件下(相同的培养基、唯独及培养时间) ，同种微生物该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 表现出稳定的菌落特征如形状、大小、隆起程度、颜色 疑难解答 (1)如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？ 统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计 3个平板，计算出平板菌落数的平均值 每克样品中的菌落数=(C/V) *M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数， V代表涂布该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 平板时所用的稀释液的体积( ml), M代表稀释倍数 【典题解析】 下列是关于检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(D ) 用蒸储水配制牛肉膏蛋白腺培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各 0.1 mL，分别涂布于各组平板上该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所