激活剂及抑制剂对酶活性的影响课件.pptVIP

一、实验目的 1. 掌握激活剂及抑制剂对酶 活性影响的原理。 2. 熟悉实验内容及操作步骤。 3. 了解温度对酶活性的影响。 二、实验原理 ( 一 ) 激活剂对酶活性影响的原理 使酶由无活性变为有活性或使 酶活性增加的物质称为酶的激活剂。 激活剂是指无机离子，如金属离子 Mg 2 + 、 Zn 2+ … 、酸根离子 Cl - 、 PO 4 3- … 和小分子有机物胆汁酸盐、 V C 等。 激活剂 必需激活剂 非必需激活剂 如：己糖激酶必需 由 Mg 2 + 激活 如： Cl - 是唾 液淀粉酶的激活剂 淀粉 加碘呈色 紫糊精 红糊精 无色糊精 麦芽糖 紫色 淀粉酶催化淀粉逐步水解 蓝色 红色 无色 无色 还原糖 加激活剂 Cl - ( 1 ％ NaCl ) ( 二 ) 抑制剂对酶活性影响的原理 能够有选择地使酶的活性降低 或丧失，但不能使酶蛋白变性的物 质称为酶的抑制剂。 抑制剂多与酶活性必需基团结 合，直接或间接的影响酶的活性中心， 从而抑制酶的活性。 根据抑制剂与酶结合的紧密程 度不同，又分可逆性抑制和不可逆抑 制剂。 抑制剂 可逆性抑制剂 不可逆性抑制剂 抑制剂通过非共价键或酶 - 底物 复合物可逆性结合，使酶活性降低 或丧失。采用透析或超滤等物理方 法将抑制剂除去，恢复酶活性。 抑制剂通常与酶活性中心上的必需基团形成共 价键，使酶失去活性。不能用透析、超滤等方法 将其除去，只能靠某药物才能解除，恢复酶活性。 重金属离子 Cu 2+ 对唾液淀粉酶有抑制作用 1. Cl - 对唾液淀粉酶具有激活作用 。 2. 重金属离子，例如 Cu 2+ 对唾液淀 粉酶有抑制作用， 很多药物是酶的抑制剂，通过对病 原体内某些酶的抑制作用或改变体内 某些酶的活性而发挥其治疗功效，了 解酶的抑制作用是阐明药物作用机制 和设计研究新药的重要途径。 激活剂及抑制剂对酶活性影响的意义 三、实验仪器与试剂 1. 仪器 烧杯、试管、点滴板、滴管、 漏斗、刻度吸量管、洗耳球、水浴 箱等。 2. 试剂 1 ％ 淀粉 液、 1 ％ NaCl 溶液、 1 ％ CuSO 4 溶液、 1 ％ NaSO 4 溶液、 稀碘液、唾液。 四、实验内容及操作步骤 1. 收集唾液 用 少量 （约 3 ～ 5ml ） 冷 水 漱口约 1min ，收集唾液至 漏斗中，过滤，备用。 2. 加样 试剂（ ml ） 试管 1 试管 2 试管 3 试管 4 蒸馏水 1 ml 2 ml 1 ml 1 ml 1%NaCl 1 ml 1%CuSO 4 1 ml 1% 淀粉 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1%Na 2 SO 4 1 ml 唾液 2 滴 2 滴 2 滴 2 滴 加碘现象 观察、记录实验现象。 3. 振荡混匀，同时置于37℃ 水浴中，每 2min 取出一滴，在点滴 板上做碘的呈色反应。 当点滴板上有一孔呈现无色时 ，取出水浴中的 4 支试管，各管加 碘液 1 ～ 3 滴，摇匀。 观察 4 支试管的颜色，比较反应 速度。 五、注意事项 1. 刻度吸量管不能交叉使用，否则污 染试剂，影响反应现象。 2. 实验所用试管冲洗干净；编号 1 、 2 、 3 、 4 的烧杯及滴管取淀粉水解液时不能交 叉使用，否则污染试剂，影响反应现象。 3. 做完实验所有试剂摆放好，取淀粉 的刻度吸量管冲洗干净，桌面擦干净，登 记签名。 4. 值日生听老师安排，认真打扫，经 老师批准才能离开实验室。