2019年愈伤组织培养.pptVIP

愈伤组织的器官发生顺序有四种情况： （ 1 ）愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成， 即无根的芽或无芽的根； （ 2 ）先长芽，后长根， 多数情况 ； （ 3 ）先长根，再从根的基部长芽。这种情况 较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植物； （ 4 ）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成 芽和根，然后两者结合起来形成一株植株。 第三节愈伤组织的形态发生 第 2 章 愈伤组织培养 Good Morning 植物组织培养 第 2 章 愈伤组织培养 (3 学时 ) 本章主要内容： ? 愈伤组织的诱导与分化 ? 愈伤组织的继代培养 ? 愈伤组织的形态发生 ? 不定芽和根的发生 ? 体细胞胚的发生 ? 愈伤组织培养的应用 第 2 章 愈伤组织培养 ? 1 、了解愈伤组织细胞分化的各时期的特点 ? 2 、掌握植物激素控制理论 ? 3 、掌握愈伤组织的形态发生 ? 4 、区别胚状体发生途径与器官发生途径形 成植株 ? 5 、愈伤组织培养在园艺植物育种中的应用 第 2 章 愈伤组织培养 本章教学目的与要求 ? 定义 : 是指将外植体接种到人工培养基上，在 激素作用下，进行愈伤组织诱导、生长和分 化的培养过程。 愈伤组织培养 (callus culture) 第 2 章 愈伤组织培养 第一节 愈伤组织的诱导和分化 一． 愈伤组织的诱导 ? 诱导愈伤组织的关键主要是 培养条件 ，其 中激素的成分和浓度是最重要的因素。 第 2 章 愈伤组织培养 Callus arising from leaf tissue Callus arising from vascular tissue From root From embryo culture 第一节愈伤组织的诱导和分化 Photo indicating where the callus (c) arises from 第一节愈伤组织的诱导和分化 Wound callus on the stem of an Erythrina tree 刺桐树 第一节愈伤组织的诱导和分化 二．愈伤组织的分化 ? 从外植体脱分化形成 典型的 愈伤组织大致 可分为三个时期： 第一节愈伤组织的诱导和分化 愈伤组织分化 诱导期 分裂期 分化期 Stage 1. Induction （诱导期） : 第一节愈伤组织的诱导和分化 细胞准备进行分裂的时期，是愈伤组织形成起点。 诱导期细胞内发生的变化 气体交换增加，如氧气的吸收增加 RNA 含量增加（增加到 300% ） 蛋白质量增加（每个细胞的总增加量为 200% ） 酶活性增强 第一节愈伤组织的诱导和分化 Stage 2. Cell division 分裂期 指外植体细胞经诱导脱分化，不断分裂、 增生子细胞的过程。 第一节愈伤组织的诱导和分化 1. 细胞的数目迅速增加。 2. 每个细胞平均鲜重下降。 3. 细胞体积小，内无液泡。 4 ．细胞的核和核仁增大到最大。 5. 细胞中 RNA 含量减少，而 DNA 含量保持不变。 6. 随着细胞不断分裂和生长，细胞总干重、蛋 白质和核酸量大大增加，新细胞壁合成极快 。 第一节愈伤组织的诱导和分化 分裂期细胞的主要表现 : 细胞分裂快，结构疏松，缺少有组织的结构， 维持其不分化的状态，颜色浅而透明。 1mg/l 2,4-D 10mg/l 2,4-D 第一节愈伤组织的诱导和分化 分裂期愈伤组织的共同特征： Stage 3. Differentiation 分化期 指愈伤组织细胞停止分 裂，细胞内发生一系列形 态和生理上的变化 , 形成一 些不同形态和功能的细胞 的时期。 第一节愈伤组织的诱导和分化 A 细胞分裂部位和方向发生改变： B 形成瘤状或片状的 分生组织结节 。或 维管组织结节。 C 细胞的体积相对稳定，不再减少。 D 出现了各种类型的细胞：如管胞、纤维细胞、薄壁细胞、 分生细胞、色素细胞等。 E 生长旺盛的愈伤组织呈乳白色、白色或浅绿色，老化的 多转化为黄色或褐色 。 第一节愈伤组织的诱导和分化 分化期细胞特点： Callus types ： Friable 易碎 Hard / lignified callus Rhizogenic callus 生根的愈伤 Callus exudi