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动物细胞工程 动物细胞工程 取材:动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 过程:原代培养 传代培养 形成细胞系 应用 大规模生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体等 医学上用于自体细胞的扩增、移植,如烧伤 病人的皮肤移植 培养动物细胞检测有毒物质 融合因素:灭活的仙台病毒、新城鸡瘟 病毒等;聚乙二醇 实例:人一鼠,人一兔、鼠一兔等 应用:主要用于制备单克隆抗体 概念: 由单个 B 细胞克隆形成的细胞群产生化学 性质单一、特异性强的抗体 制备 : B 淋巴细跑 骨髓瘤细胞 继续培养(体外培养液、 小鼠腹水中) 单克隆抗体 应用 : 用于疾病的诊断、治疗和预防,因其特 异性强、灵敏度高,与常规抗体相比,优势 明显 ( 1 )为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合 ? (小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖, B 淋巴细胞能够产生抗体,细胞的同源性越近,融合形 成的杂种细胞越易成活。) ( 2 )骨髓 瘤 细胞是 癌 细胞吗 ? (有无限增殖能力(失去凋亡机制,失去接触抑制等)的 细胞是肿瘤细胞,而具有转移能力的肿瘤细胞,称为癌细 胞,所以说,瘤细胞不能等于癌细胞。) 问题解释 ( 3 )整个制备过程为何要经过两次筛选 ? (第一次筛选得到杂交瘤细胞(多种),第二次需先 在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况 下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞 群。由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的,所 以产生的抗体必然是化学性质单一的,特异性强的单 克隆抗体。这里的 单克隆 确有 单个细胞 克隆的含义, 只不过克隆的不是 B 淋巴细胞,而是 杂交瘤细胞 。) 4 . 哺乳动物的胚胎移植 过程:用激素促进母畜超数排卵 母畜子宫内 体外受精 培养 早期胚胎 生出小动物 实例:试管牛的培育 5 . 核移植技术 1 、右图是某同学根据杂交瘤技术的方法, 设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。 请据图回答: (1) 该方案能达到预期效果吗? ___ , 原因是 ______________________ 。 (2) 图中②为 __ 过程,常用 __ 诱导剂。 该细胞继承了 ___________________ 。 (3) 图中③进行细胞培养,目的是 _____ 。 (4) 图中④的细胞培养,能获得 __ _ 细胞,便于大规模培养。 (5) 破伤风杆菌的抗体最终可从 _______ 和 ___ _ 中提取。 (6) 该方案的目的是 _________ ________________ 。 课堂练习 答案: ( 1 )不能;小鼠没有注射抗原,不能从小鼠体 内获得产生特异性抗体的单一 B 淋巴细胞 ( 2 )细胞融合 灭活的仙台病毒 双亲细胞 的遗传物质,既能产生特异性抗体又能无限增殖 ( 3 )挑选出能产生特异性抗体的细胞群 ( 4 )足够数量的 ( 5 )培养液 小鼠腹水中 ( 6 )制备抗破伤风杆菌单克隆抗体 ( 3 )已知有耳垂( A )对无耳 垂( a )是显性的。若图中患 者是无耳垂( a a )的,提供卵细胞的女性是有耳垂( A a )的,核 移植后得到的细胞所培育出的人耳是否具有耳垂? ( 4 )按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是 ;其原 因是 。 ( 5 )移植细胞具有的基因结构编码区的特点是 ,合成 蛋白质时,之前同时转录,再经过 和 ,决定蛋白质编 码顺序的是 。 ( 1 )它属于哪项生物工程? ( 2 )科学家将患者的体细胞 的核植入去核的
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