第十章遗传工程-周玉亮3电子教案.pptVIP

第10章 遗传工程-- 10.2 基因工程 （3）电穿孔法 短时间的高压直流电脉冲的冲击可以使原生质膜的分子疏松，形成暂时性的小孔(3nm～4nm)，存在于原生质体周围溶液中的外源DNA可以通过这种小孔进入原生质体，实现基因的直接转移。这种方法转化效率较高，操作简便。 第10章 遗传工程-- 10.2 基因工程 （4）微束激光打孔法 原生质体在短时间微束激光照射下也可在质膜表面形成小孔(约0.25μm2左右)，使DNA分子进入细胞。此法与电激穿孔法相比，要求的仪器比较复杂，而且对细胞的伤害较高。 （5）基因枪法 通过高速飞行的包裹DNA的金属（金粉/钨粉）颗粒直接导人到受体细胞内，从而实现转化。依据所使用的动力不同分为三类：第一类是以火药爆炸力作为动力的加速微弹；第二类是以电弧放电蒸发液滴作为动力；第三类是以高压气体作为动力。 台式基因枪 手持式基因枪 6）通过植物性器官进行基因直接转移 将外源DNA涂抹柱头或将其注射入子房内，通过花粉管通道和珠孔进入胚囊和卵细胞。 第10章 遗传工程-- 10.2 基因工程 10.2.4 动物的转基因技术（自学） 第10章 遗传工程-- 10.2 基因工程 10.2.5 转基因的鉴定 （a）利用质粒上特异的筛选标记进行特异筛选 （b）分子杂交筛选（Southern） （c）其他的方法（RT-PCR,Nortern,Western ） Km抗性筛选 PCR鉴定（DNA水平） WT OE1 OE2 OE3 RT-PCR（RNA水平） WT OE1 OE2 OE3 Western blot 检测（蛋白水平） 第10章 遗传工程-- 10.2 基因工程 10.2.6 基因工程的应用 1 微生物上的应用： 1）生产基因工程药物：像胰岛素，干扰素、人生长激素 因子、表皮生长因子、乙型肝炎工程疫苗。 2）治理环境污染：用细菌分解海上漏油 2 转基因植物上的应用： 1）抗虫：Bt蛋白 2）抗除草剂 3）抗病 4）耐贮藏水果 3 转基因动物上的应用： 1）老鼠：医学研究，像免疫系统 2）鸡：抗病 3）牛：更高的产奶量，瘦肉更多 4）猪、羊：在他们的乳汁中生产人类所需的蛋白 乙肝疫苗 我国生产的部分基因工程药物和疫苗 我国生产的部分胰岛素产品 基因工程在微生物上的应用 用基因工程改造细菌用来分解海上泄漏的原油 来源：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)； 活性成分：杀虫晶体蛋白（insecticidal crystal protein，ICP）和营养期杀虫蛋白（vegetative insecticidal protein，VIP）； 特点：ICP选择性的毒害靶标害虫，对人畜安全； 作用对象：二化螟、三化螟、大螟、稻纵卷叶螟、稻青虫等鳞翅目害虫； 杀虫机理：ICP本身并不具备毒性，当ICP被目标昆虫取食后，在昆虫中肠的碱性环境中ICP会被降解为具毒性的活性肽，引起细胞膜穿孔，破坏细胞渗透平衡，最终导致昆虫停止取食而死亡。 Bt毒蛋白 第10章 遗传工程 Genetic Engineering 10.1 细胞工程 10.2 基因工程 10.3 克隆技术（自学） 遗传工程就是人类用近代科学技术的最新成就，在离体条件下进行遗传操作，按照既定目标，有计划地改变生物遗传性，甚至建造新物种的一门学科。 广义：细胞工程、基因工程、克隆技术等。 狭义：基因工程。 第10章 遗传工程-- 10.1 细胞工程 细胞质工程(cytoplasm engineering) 包括细胞质的代换和添加以及细胞器的代换和添加等。将一个种(或品种)的细胞质用另一个种(或品种)取代，称为细胞质代换(cytoplasm substitution)。 植物：回交法 动物：核移植法 多次回交　通过多次和雄性亲本回交，最后可以得到细胞质来自一个品系而染色体则几乎全部来自另一品系的杂交子代。 黑羊 白羊 白羊 黑羊 第10章 遗传工程-- 10.1 细胞工程 细胞融合（cell fusion ） 概念：又称体细胞杂交（somatic hybridization），指将不同来源的原生质体（去壁细胞）相融合并使之分化再生，形成新物种或新品种的技术。 西红柿“甜又香” 马铃薯“白又鲜” 第