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临床微生物学检验技术 第十一章 弯曲菌属检验、螺杆菌属检验 临床微生物学检验技术 第一节 弯曲菌属 临床微生物学检验技术 一、分类 • 弯曲菌属属于弯曲菌目、弯曲菌科，至少有30个种和亚种 • 对人致病的有： 空肠弯曲菌空肠亚种（C ．jejuni subsp ．Jejuni ） 空肠弯曲菌多伊尔亚种（C ．jejuni subsp ．doylei ） 大肠弯曲菌（C ．coli ） 胎儿弯曲菌胎儿亚种（C ． fetus subsp ．fetus ） 胎儿弯曲菌性病亚种（C ． fetus subsp ．venerealis ） 简明弯曲菌（C ．concisus ） 形弯曲菌（C ．curvus ） 昭和弯曲菌（C ． showae ） 纤细弯曲菌（C ．gracilis ） 红嘴鸥弯曲菌(C ．lari) 乌普萨拉弯曲菌（C ．upsaliensis ） 豚肠弯曲菌豚肠亚种（C ．hyointestinalis subsp ．hyointestinalis ） 痰液弯曲菌痰液生物变种（C ． sputorum biovar sputorum ）等 临床微生物学检验技术 二、临床意义 • 弯曲菌属细菌多引起人类肠道感染，也可引起肠道外感染， 特别易感于艾滋病和其他免疫缺陷患者 • 空肠弯曲菌是腹泻最常见的病原菌，一般经口传播或与动 物直接接触感染 • 弯曲菌能在肠道内定植和感染肠黏膜其动力起重要作用。 空肠弯曲菌感染可以导致小肠和大肠出现急性肠炎 • 空肠弯曲菌感染后可引发吉兰- 巴雷综合症（Guillain-Barré syndrome, 一种急性外周神经脱髓鞘炎症性疾病）和反应 性关节炎 • 简明弯曲菌、曲形弯曲菌、直肠弯曲菌、昭和弯曲菌、纤 细弯曲菌和胎儿弯曲菌性病亚种主要引起肠外感染，可致 牙周疾病、头、颈和内脏的深部感染和败血症等 临床微生物学检验技术 三、生物学特性 • 1．形态 呈逗点状、S形或海鸥展翅形，在不利环境下可变球形 • 2 ．染色 革兰染色阴性 • 3．结构 细菌一端或两端有单鞭毛，运动活泼 • 4 ．生长条件 微需氧，最适生长温度为42℃，少数菌为25℃。营养要 求高，需在含血液或血清培养基中生长，生长速度缓慢 • 5．菌落特征 初分离可见扁平粗糙型和细小光滑型两种菌落 • 6 ．生化反应 不分解糖类，氧化酶阳性 • 7．抵抗力 对冷热均敏感，培养物在室温可存活2~40周；干燥环境中 存活3小时。56℃ 5分钟即被杀死 临床微生物学检验技术 （一）空肠弯曲菌属检验程序 临床微生物学检验技术 （二）标本采集 • 标本：粪便（包括肛拭子）和血液 • 标本采集后注意事项 1．应立即送检 2．若在2小时内不能送检，粪便标本应接种 于Cary-Blair运送培养基，置4℃保存 • 标本在4℃可保存3周 临床微生物学检验技术 （三）标本直接检查 直接显微镜检查 粪便与肛拭子： • 普通显微镜：革兰阴性，弧形、S形、海鸥展翅形或螺旋 形小杆菌 • 暗视野或相差显微镜：投镖样或螺旋样运动 核酸检测 PCR方法检测粪便中弯曲菌核酸 临床微生物学检验技术 （四）分离培养 • 关键：选择性培养基和孵育条件 • 常用培养基：改良的Skirrow’s 培养基、Campy-BAP等 • 培养条件：5%O 、10%CO 及85%N 2 2 2 • 温度和时间： 空肠和大肠弯曲菌最适温度为42 ℃，一般72h后观察菌落； 胎儿弯曲菌最适温度是37℃，一般培养72h~7d观察菌落。 故临床标本需分别置于37℃和42 ℃中培养，以防漏检。 • 弯曲菌的菌落特征: 菌落细小，粉红灰色、灰白或黄灰色、轻微黏液样， 有些菌落沿接种线有拖尾样外观 临床微生物学检验技术 鉴定要点 • 革兰染色阴性；菌体弯曲或呈S形、海鸥展翅形；氧化