海参岩藻聚糖改善LPS诱导的C57BL_6J小鼠急性肝损伤的机制.pdf

摘 要 摘 要 炎症是机体抵御外界刺激和损伤的一种防御反应，并且炎症反应与许多疾病密切相 关，如心血管疾病、癌症和神经系统疾病等。乙酰水杨酸等环氧化酶抑制剂是常用抗炎 药物，但长期使用这些药物会引起严重的毒副作用，如胃糜烂和肾脏损伤等。岩藻聚糖 （fucoidan,FUC）是海参体壁主要的成分，其作为天然低毒的水溶性物质具有多种生物 Apostichopusjaponicus 活性，如抗炎、抗癌、抗凝血等。本实验以海参 （ ）为原料制备 FUC Aj-FUC lipopolysaccharide,LPS C57BL/6J ，并探讨 在脂多糖 （ ）诱导的 小鼠急性肝 损伤中是否起到抗炎作用及潜在的分子机制。 本实验采用木瓜蛋白酶降解海参粗多糖，利用ÄKTA-FPLCpure 150 快速蛋白分离 TM Q-Sepharose Fast Flow, QFF 纯化系统，结合阴离子交换层析 （ ）及分子筛柱层析 （Sephacyl S-200 H.R）分离制备Aj-FUC，采用高效液相色谱 （high performance liquid chromatography,HPLC gel permeation chromatography,GPC ）、凝胶渗透色谱 （ ）、红外 infraredradiation,IR Aj-FUC 光谱 （ ）等分析方法对 单糖构成、纯度及分子量等理化性质 进行分析。结果表明：海参多糖粗品经QFF 柱层析分离得到海参岩藻糖基化硫酸软骨 fucolysated chondroitin sulfate, FCS FUC Aj-FUC 202.3 素 （ ）和 两个组分。 的分子量为 kDa，糖含量为64.5%，硫酸根含量为19.8%。经HPLC 检测Aj-FUC 主要由甘露糖、葡 萄糖胺、葡萄糖醛酸、半乳糖胺、半乳糖和岩藻糖构成，他们的摩尔比为3.9 : 1.0 :2.6 : 7.8 : 1.7 :23.6。 25 C57BL/6J 23 4g 本实验选用 只 小鼠 （雄性，体重： ± ）购自北京华阜康生物科技 股份有限公司 （许可证号：SCXK2014-0004），适应7d 后，小鼠随机分为5 组，即空 n 5 n 5 +LPS n 5 白对照组 （ ，生理盐水），模型组 （ ，生理盐水 ），乙酰水杨酸组 （ ， 20 mg/kg/d+LPS Aj-FUC n 5 Aj-L 60 mg/kg/d+LPS ）， 低剂量组 （ ， ： ）及高剂量组 （n 5，Aj-H：180mg/kg/d+LPS）。小鼠用生理盐水或不同药物分别灌胃给药7 d，在 2 h LPS 5.0mg/kg 4 h 末次给药 后，禁食并腹腔注射