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2020-08-17 发布于广东
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浓度换算公式.pdf

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学海无涯核酸、核苷酸的基本换算核酸、核苷酸的基本换算 1．核酸的换算： (1)摩尔数与质量：1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol 1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol 1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol 1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol 1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmol 1 μg M13mp18/19 DNA (7.250bp) = 0.21 pmol 1 μg l phage DNA (48,502bp) = 0.03 pmol 1 pmol 1,000bp DNA = 0.66 μg 1 pmol pUC18/19 DNA (2,688bp) = 1.77 μg 1 pmol pBR322 DNA (4,361bp) = 2.88 μg 1 pmol SV40 DNA (5,243bp) = 3.46 μg 1 pmol FX174 DNA (5,386bp) = 3.54 μg 1 pmol M13mp18/19 DNA (7.250bp) = 4.78 μg 1 pmol l phage DNA (48,502bp) = 32.01 μg (2)光吸收值与浓度： 1 OD260 dsDNA = 50 μg/ml = 0.15 mmol/L 1 OD260 ssDNA = 33 μg/ml = 0.10 mmol/L 1 OD260 ssRNA = 40 μg/ml = 0.12 mmol/L 1 mmol/L dsDNA = 6.7 OD2601 mmol/L ssDNA = 10.0 OD2601 mmol/L ssRNA = 8.3 OD260 (3)分子量： 1 个脱氧核糖核酸碱基的平均分子量为333 Daltons 1 个核糖核酸碱基的平均分子量为340 Daltons (4)核酸末端浓度：环状DNApmol ends = pmol DNA × number of cuts ×2 线性DNApmol ends = pmol DNA ×(number of cuts ×2 + 2) 1 μg 1,000 bp DNA = 3.04 pmol ends 1 μg pUC18/19 DNA (2,688 bp) = 1.14 pmol ends 1 μg pBR322 DNA (4,361 bp) = 0.7 pmol ends 1 μg SV40 DNA (5,243 bp) = 0.58 pmol ends 1 μg FX174 DNA (5,386 bp) = 0.56 pmol ends 1 μg M13mp18/19 DNA (7.250 bp) = 0.42 pmol ends 1 μg l phage DNA (48,502 bp) = 0.06 pmol ends2．核苷酸的换算： (1)分子量： MW (Da) = 333 × N (number of bases) (2)浓度： C (μmol/L or pmol/ml) = OD260 / (0.01 × N)C (ng/ml) = OD260? MW / (0.01 × N)MW -- molecular weightN -- number of basesOD260 -- absorbance at 260 nm (3)双链DNA 与寡核苷酸的熔点 1 学海无涯短于25bp 的双链寡核苷酸Tm = 2 (A + T) + 4 (G + C) 长于25bp 的双链寡核苷酸Tm = 81.5 + 16.6 ( lg[J+] ) + 0.41 (%GC) - (600/N) - 0.63 (%formamide)N -- 引物的长度(以碱基数计算)J+ -- 单价阳离子浓度 (4)DNA 与表达蛋白之间分子量换算 1 kb DNA = 333 amino acid ≈3.7 × 104 Da 10,000 Da Protein ≈ 270 bp DNA30,000 Da Protein≈ 810 bp DNA 50,000 Da Protein ≈2701 bp DNA100,000 Da Protein ≈ 27 kb DNA