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摘 要I
AbstractIII
1文献综述 1
1.1引言 1
1.2 马铃薯疮痂病的研究现状 1
1.2.1马铃薯疮痂病的病原种类 1
1.2.2 马铃薯疮痂病病原的鉴定方法2
1.3枯草芽孢杆菌的研究进展3
1.3.1枯草芽孢杆菌简介3
1.3.2 枯草芽孢杆菌在生物防治上的应用4
1.4 枯草芽孢杆菌抗菌蛋白的研究进展5
1.4.1枯草芽孢杆菌抗菌蛋白的产生途径5
1.4.2 枯草芽孢杆菌抗菌蛋白的作用机制6
1.4.3枯草芽孢杆菌抗菌蛋白的分离纯化6
1.4.4 枯草芽孢杆菌抗菌蛋白的产量优化7
1.5研究目的与意义8
2 材料与方法9
2.1材料9
2.1.1供试菌株9
2.1.2 供试培养基9
2.1.3试验用缓冲溶液9
2.1.4 主要试剂9
2.1.5主要仪器 10
2.1.6试验所用软件11
2.2 方法11
2.2.1 目的菌株的分离与筛选11
2.2.2 目的菌株的鉴定11
2.2.3抗菌蛋白的分离、鉴定与活性测试 14
i
抗菌蛋白AMEP412 的鉴定及其在防治马铃薯疮痂病上的应用
2.2.4 抗菌蛋白的相关性质分析 16
2.2.5抗菌蛋白的产量优化 18
2.2.6种植试验 19
3 结果与分析21
3.1生防菌株的分离与筛选21
3.2 生防菌株的鉴定21
3.2.1形态学及生理生化性质分析21
3.2.2 分子生物学鉴定分析22
3.3抗菌蛋白的分离与鉴定24
TM
3.3.1Source Q 离子交换层析24
TM
3.3.2 Superdex 75分子筛层析25
3.3.3质谱测序分析25
3.4 抗菌蛋白的性质分析27
3.4.1抗菌蛋白的最小抑菌浓度分析27
3.4.2 抗菌蛋白的稳定性检测28
3.4.3抗菌蛋白的功能区分析29
3.4.4 抗菌蛋白的定位分析31
3.4.5抗菌蛋白的抗菌谱分析31
3.5抗菌蛋白的发酵条件优化32
3.5.1碳源对蛋白产量的影响32
3.5.2 氮源对蛋白产量的影响33
3.5.3pH 对蛋白产量的影响34
3.5.4 培养温度对蛋白产量的影响35
3.5.5接种量对蛋白产量的影响35
3.5.6培养时间对蛋白产量的影响36
3.5.7转速对蛋白产量的影响36
3.5.8Plackett-Burman 试验分析37
3.5.9 中心组合设计试验分析38
3.5.10优化条件的验证试验分析42
3.6 菌株BU412 的发酵液对马铃薯疮痂病的防效42
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