代谢性谷氧酸受体1在麦芽酚铝致大鼠突触可塑性改变中的调节作用.pdf

目 录 摘 要I ABSTRACT IV 常用缩写词中英文对照表VIII 前 言 1 1 材料与方法 3 1.1 实验材料 3 1.2 主要试剂 3 1.3 主要仪器设备 4 1.4 实验所需溶液配制 4 1.5 实验方法 5 1.6 统计学方法 10 2 结 果 10 2.1 实验动物基本情况 10 2.2 麦芽酚铝对大鼠突触可塑性及相关蛋白的影响 11 2.3 MGLUR1 在麦芽酚铝致大鼠突触可塑性损伤中的调节作用 20 3 讨 论 32 4 结 论 36 参考文献 37 综 述 41 致 谢 50 个人简介 51 山西医科大学硕士学位论文 代谢性谷氨酸受体1 在麦芽酚铝致大鼠突触可塑性改变中的 调节作用 摘 要 目的： 通过急性侧脑室注射麦芽酚铝，探讨麦芽酚铝对大鼠突触可塑性的损伤，以及 mGluR1 在麦芽酚铝致大鼠突触可塑性改变中的调控作用。 方法： 无特定病原体级 （SPF）健康成年雄性SD 大鼠54 只，在山西医科大学劳动卫 生教研室动物实验室适应性喂养一周后，进行侧脑室插管手术，术后一周按体重随 机分为 9 组，分别为手术对照组（只进行侧脑室插管手术）、生理盐水对照组（注 射生理盐水5µL）、麦芽酚铝染毒组（4 、16、64mM Al(mal) ，5µL ）、mGluR1 激动 3 剂组（0.1µM DHPG ，5µL）、mGluR1 拮抗剂组（0.2µM MCPG ，5µL ）、麦芽酚铝 +mGluR1 激动剂组（16mM/3µL Al(mal) +0.1µM/2µL DHPG ）、麦芽酚铝+mGluR1 3 拮抗剂组（16mM/3µLAl(mal) +0.2µM /2µL mGluR1 MCPG ）。每2 天定时染毒，连 3 续 10 天。染毒结束后，采用Y 迷宫检测大鼠的空间记忆学习能力；采用在体电生 理技术记录大鼠海马 CA1 区兴奋性突触后电位（fEPSP ）；采用实时荧光定量 RT-qPCR 技术检测各组海马mGluR1 ，PKC ，PKCγ 和NMDAR 各亚基mRNA 的表 达水平；Western Blot 检测mGluR1 ，PKC ，PKCγ ，NMDAR 各亚基蛋白蛋白表达 水平，并检测NMDAR1 和NMDAR2B 的磷酸化水平。 结果: 1.麦芽酚铝对大鼠海马突触可塑性的抑制作用及相关蛋白表达的影响 Y 迷宫检测结果显示，与手术对照组比较生理盐水对照组自发交替反应率无明 显变化（P0.05 ），与生理盐水对照组相比，16mM Al(mal)3 染毒组自发交替反应 I 山西医科大学硕士学位论文 率 20.5% （P0.05 ）。在体电生理检测显示，与手术对照组比较生理盐水对照组在 各个时间点无统计学差异（P0.05 ），在同一时间点，与生理盐水对照组相比较， 随着Al(mal)3 剂量的增加，大鼠标化fEPSP 平均幅值降低 （P0.05 ）；在同一处理 组，与第 0min 比较，随着刺激记录时间的延长，大鼠标化 fEPSP 平均幅值降低 （P0.05 ）。PCR 实验结果显示，与手术对照组比较生理盐水对照组各mRNA 表达 无明显差异（P0.05 ），与生理盐水对照组相比较，16mM Al(mal) 染毒组mGluR1 3 mRNA 表达升高56.9%，PKC