分子生物学研究方法-PCR.pptxVIP

分子生物学研究方法;PCR技术在医学中的应用;一.多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaciton,PCR) （一）原理;;;;;;;二 PCR的应用;;(二）利用PCR对基因功能进行 分析和改造; (三） 基因拼接;（四）In vitro evolution of gene- coding protein;DNA Shuffle; 怎样提高高保真的重组体 1．在步骤2）使用Mn2+而不是Mg2+ 2．在PCR步骤使用高保真的耐热DNA聚合酶;PCR Random Mutagenesis;怎样获得理想的突变率 ;2．突变偏向（mutational bias) 评估方法：1）transition/transversion Transition： 嘌呤突变为嘌呤，嘧啶突变为嘧啶 Transversion: 嘌呤突变为嘧啶 2）A或T转变为G或C的程度，或者是反过来 AT GC/GC AT ; （五）．基因表达及其调控的分析;;2,Chromatin immunoprecipitation(ChIP) 主要应用:研