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第六章 分子生物学基本研究法（下）—基因功能研究技术;基因表达研究技术 基因敲除技术 蛋白质及RNA相互作用技术 基因芯片及数据分析 利用酵母鉴定靶基因功能 其他分子生物学技术; 6.1 基因表达研究技术; 常规SAGE方法（short SAGE）基本流程 连接子1和连接子2的5ˊ端分别加有氨基，以防止5ˊ端相连接。;LongSAGE技术;6. 1. 2 RNA的选择性剪接技术;;一般用RT-PCR法研究一个基因是否存在选择性剪接。选择性剪接使一个基因翻译为多种蛋白质序列。分析人类基因组数据发现60%的基因在表达中可通过选择性剪接产生各种形式的mRNA。;该基因编码一个神经无轴突定向受体，4号外显子有12个变异体，6号外显子有48个变异体，9号外显子有33个变异体，17号外显子有2个变异体。推测该基因共有12×48×33×2=38016剪接异构体。;6. 1. 3 原位杂交技术;RNA原位杂交：一般用放射性或非放射性（如地高辛、生物素等）标记的特异性探针与被固定 的组织切片反应，若细胞中存在与探针互补的mRNA分子，两者杂交产生双链RNA，就可通过放射性标记或经酶促免疫显色，对该基 因的表达产物做出定性定量分析。;用组织原位杂交技术检测棉花纤维特异基因的表达;荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH);6. 1. 4 基因定点突变