工艺07 第四章 灭菌与空气的净化.pptVIP

第四章 灭菌与空气的净化 第一节 灭菌的方法 一、灭菌的方法 二、湿热灭菌的原理 1、微生物死亡动力学——对数残留定律 2、温度对死亡速率常数k值的影响 3、温度对营养物质分解破坏速率常数k’的影响 三、发酵培养基的灭菌 1、培养基湿热灭菌方法 2、影响培养基灭菌的因素 3、培养基灭菌时间的计算 四、培养基与设备、管道灭菌条件 一、灭菌的方法 1、化学试剂灭菌法 2、电磁波、射线灭菌法 3、热灭菌法 (干热、湿热和火焰灭菌法) 4、过滤除菌法 (阻留微生物，达到除菌的目的) 1、化学试剂灭菌法 化学消毒剂方法的局限性 由于该方法灭菌与培养基中的一些成分发生反应，并且会残留在培养基中，所以只适合一些环境及器皿表面的消毒而不适合于培养基的灭菌。 2、电磁波、射线灭菌法 3、热灭菌法 干热灭菌法：160℃，1 h。使微生物体内的蛋白质发生氧化作用而死亡。用于实验器具和材料的灭菌。 湿热灭菌法：利用饱和蒸汽灭菌。使微生物体内的蛋白质发生凝固作用而致死。 由于蒸汽有很强的穿透力，冷凝时放出大量的潜热，来源方便，价格低廉，灭菌效果好，是目前最基本的适合培养基和设备的灭菌方法。一般条件为：121℃，30 min。 火焰灭菌法 利用火焰直接把微生物杀死。方法简单、灭菌彻底，但适用范围有限，接种针、玻璃棒等。 4、过滤除菌法 利用过滤的方法截留微生物的方法。适合于澄清的液体和气体的除菌。工业上常用此法制备大量的无菌空气，供好气性微生物的培养使用。 第一节 灭菌的方法 一、灭菌的方法 二、湿热灭菌的原理 1、微生物死亡动力学——对数残留定律 2、温度对死亡速率常数k值的影响 3、温度对营养物质分解破坏速率常数k’的影响 三、发酵培养基的灭菌 1、培养基湿热灭菌方法 2、影响培养基灭菌的因素 3、培养基灭菌时间的计算 四、培养基与设备、管道灭菌条件 二、湿热灭菌的原理 （一）微生物死亡动力学——对数残留定律 微生物受热死亡的主要原因是高热能使蛋白质变性，这种反应可认为是单分子反应，死亡速率可视为一级反应，即与残存的微生物数量成正比， t=（2.303/k）lg (N0/ Nt) t 取决于 污染的程度N0：一般只考虑芽孢细菌和细菌的芽孢之和 灭菌的程度Nt： Nt =0，t→∞；常用Nt =0.001，也就是说1000次灭菌中有一次失败的机会。 反应速率常数k：是微生物耐热性的特征， k 的大小与微生物的种类和灭菌温度有关。 影响k值大小的因素 相同的温度下，微生物越耐热，k值越小。 eg.细菌芽孢的耐热性比营养细胞大，细菌芽孢的k值比营养细胞小得多。 同一种微生物，灭菌温度越低，k值越小； 灭菌温度越高，k值越大。 t=（2.303/k）lg (N0/ Nt) 因此，提高灭菌温度， k值增大，灭菌时间t显著缩短。 （二）温度对死亡速率常数k值的影响 温度可以影响反应速度常数。其关系用Arrhenius方程表示: k =Aexp(－ ⊿E/RT) 式中： A—常数（s-1 or min-1)； R—气体常数，8.314 J/mol?K; T —绝对温度，K; ⊿E —微生物死亡活化能，J/mol. 两边同时取对数得：㏑ k = ㏑ A－ (⊿E /RT)…….. ⑴ 求导： d㏑K/dT= ⊿E /RT2…………. ⑵ 从（2）式看出： ⊿E 大， ㏑K对T的变化率越大，即对温度变化敏感。 培养基中的热灭菌既要杀死杂菌，又要保存其中的有效成分，因而研究热对营养物质的影响是十分必要的。 （三）温度对营养物质分解破坏速率常数k’的影响 同样是为一级反应：dC/dt= k’ C 其中： C —培养基内易被破坏成分的浓度mol/L; t —灭菌时间（min,s); k’ —分解速度常数。 而且K’同样受到温度的影响， 符合Arrhenius方程，即有：㏑ k’ = ㏑ A’－ (⊿E’ /RT)…….. ⑴’ d㏑ k’ / dT= ⊿E’ /RT2…………. ⑵’ 第一节 灭菌的方法 一、灭菌的方法 二、湿热灭菌的原理 1、微生物死亡动力学——对数残留定律 2、温度对死亡速率常数k值的影响 3、温度对营养物质分解破坏速率常数k’的影响 三、发酵培养基的灭菌 1、培养基湿热灭菌方法 2、影响培养基灭菌的因素 3、培养基灭菌时间的计算 四、培养基与设备、管道灭菌条件 三、发酵培养基的灭菌 培养基中含有丰富的营养，工业化生产中，体积大，生产的时间长